膵癌の浸潤転移機構における成長因子/細胞接着因子に関する基盤的研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470254
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 土井 隆一郎 京都大学, 医学研究科, 講師 (20301236)
• 研究分担者: 藤本 康二 京都大学, 医学研究科, 助手 (70335280) ; 今村 正之 京都大学, 医学研究科, 教授 (00108995)
• キーワード: TGF-β / RhoB / 膵癌 / 浸潤 / 転移

研究概要

正常上皮細胞としてラット腸上皮(RIE-1)細胞を,野生型DPC4株として膵癌細胞株PANC-1を,DPC4完全欠失株として膵癌細胞株BxPC-3,大腸癌細胞株SW480.7,乳癌細胞株MDA-MB-468を使用した.RhoB変異遺伝子(N19RhoB, V14RhoB)をRIE-1細胞,PANC-1細胞に移入し,変異RhoB発現安定株を樹立.TGF-βによる遊走能・浸潤能をBoyden chamberを用いて検討しTGF-β誘導性の形態変化を観察するとともに,E-cadherin・ZO-1,Vimentinを指標に上皮間葉系細胞化生(EMT)を検討した.RIE-1細胞,PANC-1細胞において,TGF-βは時間依存性にRhoB発現を集積したのに対し,RhoA発現はPANC-1細胞で抑制,RIE-1細胞で不変であった.RIE-1細胞では,TGF-β刺激後7日後にEMTを認めたのに対し,PANC-1細胞では2日後から認めた.TGF-β刺激により,PANC-1細胞の遊走能・浸潤能は亢進したが,E-cadherin・ZO-1発現は抑制された.DPC4欠失3株では,ZO-1発現は抑制されたものの,遊走能・浸潤能,E-cadherin・Vimentin発現に差は無かった.N19RhoB・PANC-1細胞においてはTGF-β誘導性EMTおよび遊走能・浸潤能に変化無く,E-cadherin・ZO-1発現は増強した.一方,V14RhoB・PANC-1細胞ではTGF-βの有無に関わらず線維芽細胞様形態をとり,高い遊走能・浸潤能を示すとともに,E-cadherin・ZO-1発現は減少した.膵癌浸潤転移に,TGF-β/RhoB/MAPK経路とDPC4をはじめとするTGF-β/smad経路による抑制機構が存在する可能性が示唆された.

研究成果

• [文献書誌] Kawaguchi, M.: "A Novel Synthetic Arg-Gly-Asp-Containing Peptide Cyclo (-RGDf=V-) is the Potent Inhibitor of Angiogenesis"Biochemical Biophysical Research Communications. 288・3. 711-717 (2001)
• [文献書誌] Masui, T.: "Expression of METH-1 and METH-2 in pancreatic cancer: Relationship with tumor invasion"Clinical Cancer Research. 7・11. 3437-3443 (2001)
• [文献書誌] Miyamoto, Y.: "Interleukin-6 inhibits radiation induced apoptosis in pancreatic cancer cells"Anticancer Research. 21・4. 2449-2456 (2001)
• [文献書誌] Itami, A.: "Human gastrinoma cells express calcium-sensing receptor"Life Science. 70・2. 119-129 (2001)
• [文献書誌] 土井隆一郎: "膵癌の治療-現況と新しい試み-.膵癌切除術後の補助療法"外科治療. 84・6. 978-983 (2001)
• [文献書誌] 土井隆一郎: "膵癌の遺伝子治療-現状と将来の展望"外科. 63・13. 1720-1727 (2001)