慢性関節リウマチおよび変形性関節症の関節破壊に対する遺伝子治療法の開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470310
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 冨田 哲也 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (30283766)
• 研究分担者: 名井 陽 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (10263261) ; 菅本 一臣 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (40294061) ; 吉川 秀樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60191558) ; 鳥塚 之嘉 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (20324775) ; 中瀬 尚長 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (00283755)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / 変形性関節症 / NFκB / 転写因子 / 核酸医薬 / 遺伝子治療 / IL-1 / TNFα

研究概要

今年度はサルコラーゲン関節炎モデルを使用し、naked NFκB decoyによる関節破壊抑制効果および安全性を評価した。カニクイサルをbovine Type II collagenにて感作し、一週間後より膝、手、足関節にnaked NFκB decoyを直接関節内投与した。一関節当たり10-30mgのnaked NFκB decoyを使用した。投与は2ないし4週間間隔で投与した。経時的に生化学的、X線学的検討を行い初回感作後14週間で組織学的検討を行った。関節拘縮をきたした関節はnaked NFκB decoy投与群で4/20(20%)、未治療群で16/20(80%)であった。一部のサルではnaked NFκB decoy関節内投与後関節滑膜を採取しELISAにて滑膜中のIL-1β,TNFαを定量した。naked NFκB decoy投与関節において未治療群やscrambled decoy投与群(コントロール群)に比し有意にIL-1β,TNFα発現は抑制されていた。naked NFκB decoy投与群ではX線学的検討および組織学的検討において未治療群やscrambled decoy投与群に比し明らかに関節破壊は抑制されていた。生化学的検討ではnaked NFκB decoy投与による明らかな異常値の出現は認められず、間接以外の他の主要臓器においても組織学的な明らかな異常は認めらなかった。さらに安全性試験としてnaked NFκB decoy 40mgを静脈内投与して検討したが明らかな異常は認められず、naked NFκB decoy関節内投与における副作用の出現は検討した範囲では認められなかった。
変形性関節症モデルとしてラット膝関節前十字靭帯切除モデルを作成した。術後一週より膝関節内にnaked NFκB decoy及び低分子ヒアルロン酸をそれぞれ単独あるいは混合して投与した。コントロールとしてscrambled decoyを用いた。経時的には関節腫脹はnaked NFκB decoy投与あるいは低分子ヒアルロン酸との混合投与群でscrambled decoy投与群や未治療群に比し有意に抑制された。平成14年度に組織学検討を施行する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Tomita T, Nakase T, et al.: "Expression of extracellular matrix metalloproteinase inducer and enhancement of the production of matrix metalloproteinases in rhcumatoid arthritis"Arthritis Rheum. 46. 373-378 (2002)
• [文献書誌] Nakase T, Tomita T, et al.: "Involvement of BMP-2 signaling in a cartilage cap in osteochondroma"J Orthop Res. 19. 1085-1088 (2001)
• [文献書誌] Myoui A, Nakase T, Tomita T, et al.: "Novel Hydroxyapatite ceramics with an interconnective porous structure exhibit superior osteoconduction in vivo"J Biomed Mater Res.. 59. 110-117 (2002)
• [文献書誌] Nakase T, Tomita T, et al.: "Immunohistochemical detection of parathyroid hormone-related peptide, Indian hedgehog, and patched in the process of endochondral ossification in the human"Histochem Cell Biol.. 16. 277-284 (2001)
• [文献書誌] Tomita T, et al.: "Differentiation of monocytes into multinucleated giant bone-resorbing cells : two-step differentiation induced by nurse-like"Arthritis Res.. 3. 306-310 (2001)
• [文献書誌] Tomita T, Nakase T, et al.: "Expression of proteinases and inflammatory cytokines in subchondral bone regions in the destructive joint of rheumatoid arthritis"Rheumatology. 40. 247-255 (2001)