慢性関節リウマチおよび変形性関節症の関節破壊に対する遺伝子治療法の開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470310
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 菅本 一臣 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (40294061)
• 研究分担者: 名井 陽 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (10263261) ; 橋本 英雄 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (70335363) ; 吉川 秀樹 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (60191558) ; 橋本 淳 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (40237938) ; 鳥塚 之嘉 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (20324775)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / 変形性関節症 / NFκB / 遺伝子治療 / サイトカイン / 核酸医薬

研究概要

平成14年度は関節リウマチ(RA)および変形性関節症(OA)モデル動物の関節滑膜に対する関節局所のデコイ型核酸医薬導入による関節破壊抑制を分子生物学的、免疫組織学的に検討するとともに、この実験系で得られた組織をタンパクレベル、分子レベルで評価検討した。
RAモデルとしてカニクイサルにコラーゲン関節炎を発症させた。膝関節内にベクターを用いずにNFκBデコイを2週毎に計6回注射を繰り返し、関節内の滑膜炎の程度、関節軟骨の状態を関節鏡を用いて経過観察したところ、対照のスクランブル・デコイ(NFκBと結合しない合成核酸)を用いた群と比較して、滑膜炎の程度、範囲は軽く、関節軟骨のびらん変性も抑制されていた。発症後13週での関節滑膜、関節軟骨の組織学的評価でもNFκBデコイは関節破壊を抑制していた。また滑膜組織、軟骨組織を採取しRT-PCR、ELISAでIL-1b, TNFa, MMP1, MMP3の発現を検討したところこれらの炎症性サイトカインやタンパク分解酵素がNFκBデコイ投与群で有意に減少していた。
OAモデルとしてはFisherラットの膝前十字靭帯を切除しNFκBデコイ、スクランブル・デコイ、ヒアルロン酸(HA)、PBSを各々週1回、6回連続で関節内注射し組織学的評価したところ、NFκBデコイ群では他群と比較し、OAで特徴的な関節軟骨内のプロテオグリカンの減少が有意に抑制されており、OAの進行が抑制されていると判断した。また関節内滑膜と関節軟骨を回収しIL-1b、TNFaの発現レベルをRT-PCRとELISA法を用いて確認したところNFκBデコイ群でこれらの炎症性サイトカインの産生が低下してした。

研究成果

• [文献書誌] Tanaka S, Tomita T, Yoshikawa H. et al.: "Novel autoantibodies to pituitary gland specific factor 1a in patients with rheumatoid arthritis"Rheumatology. 42(2). 353-356 (2003)
• [文献書誌] Takeuchi E, Tomita T et al.: "VLA-4-dependent and -independent pathways in cell contact-induced proinflammatory cytokine production by synovial nurse-like cells from rheumatoid arthritis patients"Arthritis Res. 4(6). R10 (2002)
• [文献書誌] Nakase T, Sugamoto K, Myoui A, Tomita T, Yoshikawa H. et al.: "Distribution of genes for parathyroid hormone (PTH)-related peptide. Indian hedgehog, PTH receptor and patched in the process of experimental spondylosis in mice"J Neurosurg. 97. 82-87 (2002)
• [文献書誌] Nakase T, Sugamoto K, Myoui A, Tomita T, Yoshikawa H. et al.: "Activation of cartilage-derived morphogenetic protein-1 in torn rotator cuff"Clin Orthop. 399. 140-145 (2002)
• [文献書誌] Tomita T, Nakase T, Yoshikawa H. et al.: "Expression of extracellular matrix metalloproteinase inducer and enhancement of the production of matrix metalloproteinases in rheumatoid arthritis"Arthritis Rheum. 46(2). 373-378 (2002)
• [文献書誌] Watanabe T, Tomita T, Sugamoto K, Yoshikawa H et al.: "Periprosthetic fracture of the tibia associated with osteolysis caused by failure of rotating patella in low-contact-stress total knee arthroplasty"J Arthroplasty. 17(8). 1058-1062 (2002)