遺伝子欠損動物を用いた微小脳血管の血流維持機構と麻酔薬作用に関する研究

2004 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470327
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 畑埜 義雄 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (70115913)
• 研究分担者: 小川 幸志 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (30204077) ; 水本 一弘 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (50239258)
• キーワード: 神経型一酸化窒素合成酵素 / 揮発性麻酔薬 / イソフルラン / ノックアウトマウス

研究概要

正常(C57BL/6)および神経型一酸化窒素合成酵素遺伝子欠損(nNOS-KO)マウスを米国ジャクソンラボより購入した.これらのマウスをハロタン麻酔下に脱血死させ,脳を摘出した.ビブラトームで脳スライス標本(厚さ約150μm)を作成し,これを観察用チャンバーに入れ,顕微鏡で脳実質内動脈(径5-10μm)を観察した.CCDカメラで経時的に撮影した動脈の血管径変化の画像を,メディアコンバータを介してコンピュータに取り込み,コンピュータ上でフィジオテック社製の血管径測定用のソフトウエアを用いて解析した.脳実質内動脈の再確認のため,一部の標本は,実験終了後染色を施して顕微鏡下で観察した.
プロスタグランディンF2αで標本中の動脈を収縮させたのち,揮発性麻酔薬イソフルランによる脳血管拡張作用を観察した.イソフルランは,C57BL/6マウスでもnNOS-KOマウスでも,同様に脳実質内動脈を拡張させた.したがって,イソフルランの脳血管拡張作用には,神経型一酸化窒素合成酵素活性は関与していないものと考えられる.
ついで,高炭酸ガスによる脳血管拡張作用が,C57BL/6マウスとnNOS-KOマウスで異なるかどうかを検討する予定である.さらに,各種K^+チャネル拮抗薬,一酸化窒素合成酵素阻害薬,可溶性グアニレートシクレース阻害薬および各種フリーラジカルスカベンジャーを用い,これらの脳血管拡張の機序も検討する予定である.

研究成果

• [雑誌論文] Vascular effects of antiarrhythmic drugs and the roles of K+ channels (2004)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita H, Hatano Y
  • 雑誌名: Current Medicinal Chemistry-Cardiovascular and Hematological Agents 2 ページ: 99-106
• [雑誌論文] Lidocaine impairs vasodilation mediated by adenosine triphosphate-sensitive K^+ channels but not by inward rectifier K^+ channels in parenchymal microvessels of rat cerebral cortex (2004)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita H, Nakahata K, Dojo M, Kimoto Y, Hatano Y
  • 雑誌名: Anesthesia and Analgesia 99 ページ: 904-909
• [雑誌論文] Effects of bupivacaine enantiomers and ropivacaine on vasorelaxation mediated by adenosine triphosphate-sensitive K^+ channels in the rat aorta (2004)
  • 著者名/発表者名: Dojo M, Kinoshita H, Nakahata K, Kimoto Y, Hatano Y
  • 雑誌名: Anesthesiology 101 ページ: 251-254
• [雑誌論文] Inhibitory effect of high concentration of glucose on relaxations to activation of ATP-sensitive K^+ channels in human omental artery (2004)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita H, Azma T, Nakahata K, Iranami H, Kimoto Y, Dojo M, Yuge O, Hatano Y
  • 雑誌名: Arteriosclerosis, Thromhosis, and Vascular Biology 24 ページ: 1-6
• [雑誌論文] The vascular relaxing effects of sevoflurane and isoflurane are more important in hypertensive than in normotensive rats (2004)
  • 著者名/発表者名: Yu J, Ogawa K, Tokinaga Y, Iwahashi S, Hatano Y
  • 雑誌名: CAN J ANESTH 51:10 ページ: 979-985
• [雑誌論文] The inhibitory effects of isoflurane on protein tyrosine phosphorylation-modulated contraction of rat aortic smooth muscle (2004)
  • 著者名/発表者名: Yu J, Ogawa K, Tokinaga Y, Mizumoto K, Kakutani T, Hatano Y
  • 雑誌名: Anesthesiology 101:6 ページ: 1325-1331