ヒト前立腺癌のホルモン依存性消失の分子機構解明と新治療法への応用

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470333
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 碓井 亜 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (30034060)
• 研究分担者: 安本 博晃 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (20314750) ; 松原 昭朗 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教授 (10239064) ; 神谷 研二 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (60116564) ; 牟田口 和昭 広島大学, 医学部附属病院, 助手 (00314758)
• キーワード: ホルモン不応性前立腺癌 / FGFR2IIIb遺伝子 / アンドロゲン受容体 / FRS2りん酸化 / 遺伝子治療 / シグナル伝達経路 / アポトーシス

研究概要

ホルモン不応性ヒト前立腺癌に対するFGFR2IIIbの増殖抑制、分化誘導作用の分子機構の解明とFGFR2IIIb導入療法の開発を目的として検討し、以下のごとき成績を得た。
1)ヒト前立腺癌細胞株(PC-3)へのwild-type FGFR2IIIb遺伝子導入と遺伝子発現安定株の獲得
PC-3にFGFR2IIIb遺伝子を導入すると、対照に比べて増殖が抑制され、FGFR2IIIbのligandであるFGF-7添加によって増殖はさらに抑制された。ヌードマウスでの腫瘍形成能は、FGFR2IIIb遺伝子導入PC-3が対照に比べて腫瘍容積が有意に小さかった。このFGFR2IIIb安定発現株は、形態の変化と共に細胞分化の指標のlactoferrinやpancytokeratinが増加していた。apoptosis assayにおいて、FGFR2IIIb安定発現株に陽性反応が見られ、FGFR2IIIb遺伝子導入による増殖抑制効果は主としてアポトーシスによって生じたものと考えられた。
2)FGFR2IIIbとアンドロゲン受容体のクロストーク機構
PC-3にAndrogen Receptor (AR)発現遺伝子を移入、FGF-7、DHT存在下でのルシフェラーゼ活性値を測定すると、対照ではFGF-7添加によってARを介する転写活性促進の情報伝達を検出しなかったが、FGFR2IIIb安定発現株ではFGF-7添加でルシフェラーゼ活性値は増加し、FGFR2IIIbを介したFGF-7とARのクロストーク機構が考えられた。
3)FGFR2IIIbのシグナル伝達経路の探求
シグナル伝達経路の検索では、FGFR2IIIb安定発現株においてFGF-1・FGF-7添加によってFRS2りん酸化が強く認められ、このFRS2活性化はFGFR下流のp44/42MAPKのリン酸化を介することが確認された。

研究成果

• [文献書誌] 安本博晃, 他4名: "ヒト前立腺癌細胞株における線維芽細胞成長因子7(KGF)とアンドロゲン受容体(AR)のクロストークに関する基礎的検討"ホルモンと臨床. 49冬季増刊号. 180-183 (2001)
• [文献書誌] 亭島淳, 他7名: "放射線誘発マウス肝癌におけるIGFBP-7遺伝子の役割"ホルモンと臨床. 49冬季増刊号. 215-220 (2001)
• [文献書誌] Fukuda, S., 他10名: "Murine and human SDF2L1 is an endoplasmic reticulum stress-inducible gene and encodes a new member of the Pmt/rt protein family"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 280(1). 407-414 (2001)
• [文献書誌] Masuda, Y., 他6名: "Deoxycytidyl transferase activity of the human REV1 protein is closely associated with the conserved polymerase domain"J. Biol. Chem.. 276(18). 15051-15058 (2001)
• [文献書誌] Masuda, Y., 他4名: "Mechanisms of dCMP transferase reactions catalyzed by mouse Rev1 protein"J. Biol. Chem.. 277(4). 3040-3046 (2002)
• [文献書誌] 松原昭郎, 他7名: "再燃前立腺癌に対する内分泌療法および内分泌化学療法"西日本泌尿器科. 64(4). 193-198 (2002)
• [文献書誌] Kamiya, K., 他6名: "Proceedings of International Symposium on Radiation and Homeostasis International Congress Series"Genetic analysis of radiation-induced mouse hepatomas. 156 (2002)