前立腺癌に対する遺伝子治療製剤としてのEBV/polyplexの開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13470339
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 中尾 昌宏 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (00188880)
• 研究分担者: 水谷 陽一 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (10243031) ; 三木 恒治 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (10243239) ; 松田 修 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (00271164) ; 野本 剛史 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (20301426) ; 浮村 理 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (70275220)
• キーワード: 腎細胞癌 / 選択的COX-2阻害剤 / 抗Fas抗体 / JTE-522

研究概要

前立腺癌に対して有効な非ウイルス性遺伝子治療法を開発するために、Epstein-Barr Virus (EBV)に基づきEBNA1とoriPを含有するプラスミドベクーに対し、カチオニクポリマーやカチオニックリピッドを結合させた複合体を作製した。SCIDマウスに移植したPC-3より得られた腫瘍内に、EBV-プラスミドとpoly-amidoamine dendrimerの複合体を注射すると、腫瘍細胞にマーカー遺伝子の発現がみられ、その発現レベルは通常のプラスミドベクターとdendrimerの複合体を注入したものよりも8倍高かった。ほとんどの前立腺癌細胞はその表面にアポトシースシグナル分子であるFas(Apo-1/CD95)を発現しているため、遺伝子治療としてFas ligand (FasL)の前立腺癌細胞への導入を行った。FasL遺伝子を含むEBV-プラスミドであるpGEG. FasLを用いて、in vitroで遺伝子導入を行うと、前立腺癌細胞に対して有意な細胞障害活性がみられ、アポトシースが引き起こされていた。前立腺癌の異種移植による腫瘍中にpGEG. FasLを注入すると有意な腫瘍増殖の抑制がえられ、TUNEL染色と電子顕微鏡によって腫瘍細胞にはアポトーシスがみられた。EBVプラスミドとcationic macromoleculeの複合体を用いたFasL遺伝子導入は、遺伝子治療として前立腺癌に対する臨床応用の可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Nakanishi H, et al.: "Nonviral genetic transfer of Fas ligand induced significant growth suppression and apoptotic tumor cell death in prostate cancer in vivo"Gene Therapy. 10・5. 434-442 (2003)
• [文献書誌] Nakanishi H, et al.: "Significant antitumoral activity of cationic multilamellar liposomes containing human IFN-β gene against human renal cell carcinoma"Clinical Cancer Research. 9・3. 1129-1135 (2003)
• [文献書誌] Asada H, et al.: "Significant antitumor effects obtained by autologous tumor cell vaccine enginerered to secrete interleukin (IL)-12 abd IL-18 by means of the EBV/lipoplex"Molecular Therapy. 5. 609-616 (2002)
• [文献書誌] Cui FD, et al.: "Highly efficient gene transfer into murine liver achieved by intravenous administration of naked Epstein-Barr virus(EBV)-based plasma vectors"Gene Therapy. 8. 1508-1513 (2001)
• [文献書誌] Kishida T, et al.: "In vivo electroporation-mediated transfer of interleukin-12 and interleukin-18 genes induces significant antitumor effects against melanoma in mice"Gene Therapy. 8. 1234-1240 (2001)
• [文献書誌] Kojima M, et al.: "Clinical utility of ursodeoxycholic acid in preventing flutamide induced hepatopathy in patients with prostate cancer"International Journal of Urology. 9. 42-46 (2002)