| 研究概要 |
本研究の目的は,ラットを用いて歯周ポケット形成モデルを確立し,ポケット形成の機序を解明すること,および歯肉への機械的刺激が歯周ポケット形成を抑制できるかどうかを検討することである。
平成13年度は,ラットを用いた歯周ポケット形成モデルを確立した。Eschelichia coli由来菌体内毒素(LPS)とStreptomyces griseus由来プロテアーゼを1日1回,ラット上顎第一大臼歯の口蓋側歯肉溝内に単独,あるいは複合投与した。2,4,8週間の後,ラットを固定,脱灰,パラフィン包埋し,ヘマトキシリン・エオジンで染色した。その結果,LPSの8週間単独投与で約50%,LPSとプロテアーゼの8週間混合投与で約80%のラットにポケット形成がみられた。LPSとプロテアーゼの相乗効果でヒトに近い歯周炎ができた。
Proliferating cell nuclear antigenモノクローナル抗体を用いた免疫染色を行ったところ,ポケット形成を起こした標本では、上皮細胞の増殖が亢進していたが,線維芽細胞の増殖は正常組織と変わりがなかった。このことから,線維芽細胞に対する上皮細胞の増殖亢進がポケット形成を惹起することが示唆された。
In vitroでは,ヒト歯肉線維芽細胞に機械的刺激を与え,細胞増殖を引き出すための条件の最適化を図った。バイブレーションが骨量を増加させたという報告(Nature,412:603-604,2001)を参考に,プレートミキサーで5,10,15,20秒間のバイブレーションを1日2回,7日間行った。細胞増殖をブロモデオキシウリジンの取り込みで評価したところ,5秒間の刺激で最も増殖が高められた。
平成14年度は,歯周ポケット形成モデルの歯肉に機械的刺激を与えるための刺激装置の開発を行う予定である。また,in vitroの系でも細胞増殖を促す刺激条件の検討を行う予定である。
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