| 研究分担者 |
柴 秀樹 広島大学, 歯学部, 助手 (60260668)
河口 浩之 広島大学, 歯学部, 助教授 (10224750)
加藤 幸夫 広島大学, 歯学部, 教授 (10112062)
中村 茂夫 広島大学, 歯学部・付属病院, 助手 (00325200)
吉野 宏 広島大学, 歯学部, 助手 (50240338)
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| 研究概要 |
平成13年度は,骨髄間葉系幹細胞の分離・培養・増殖と,その細胞移植による歯周組織再生の動物実験を行った。
ビーグル犬の腸骨から骨髄液を約1ml採取し,骨髄間葉系幹細胞の分離・培養・増殖を試みた。採取した骨髄液を10%FBS(fetal bovine serum)および1% antibiotics(0.05 units/ml penicilln ＆ 0.05 units/ml streptomycin)含有DMEMにて一回washしたあとで上記のmediumにて100mm dishで培養をおこなった。その後3〜4日ごとにmedium changeを三回くり返すことで浮遊細胞を除去し、引き続いて上記のDMEMにbFGF(10ng/ml)を添加して、接着した紡錘形の細胞を間葉系幹細胞として分離した。その後、同様のmediumにて必要量の細胞が得られるまで(約3代)培養および継代をくりかえした。これらの細胞は,in vitroで軟骨,骨および筋肉に分化させることができ,多分化能を有することを確認した。
次に,この細胞の歯周組織再生に及ぼす影響を検討するため,担体とともに実験的歯周組織欠損モデルに移植し,組織観察した。ビーグル犬に3級根分岐部病変モデルを作成し,コラーゲンゲルとともに移植した。術後1ヵ月の組織標本を作製し,組織計測を行った。その結果,歯槽骨再生率は,移植細胞濃度2×10^6cells/100μlで担体のみのコントロールと比較し,有意に高い値を示した。また,セメント質再生率は移植細胞濃度2×10^5cells/100μlでコントロールと比較し有意に高い値を示した。これらの結果から,歯周組織欠損部への骨髄間葉系間細胞移植は歯周組織再生に関して有効であることが示された。
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