| 研究課題/領域番号 |
13470515
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
応用薬理学・医療系薬学
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
真弓 忠範 大阪大学, 薬学研究科, 教授 (00098485)
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| 研究分担者 |
堤 康央 大阪大学, 薬学研究科, 助手 (50263306)
中川 晋作 大阪大学, 薬学研究科, 助教授 (70207728)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| キーワード | 細胞内薬物徐放 / ナノパースフェアー / 膜融合リポソーム / DDS / オリゴヌクレオチド / 共焦点レーザー顕微鏡 / 遺伝子治療 |
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| 研究概要 |
本研究では、細胞内での薬物動態を時間的・空間的に制御出来る次世代型DDS製剤としての細胞内徐放化システムを開発することを目的とした。この研究の成果として、殆ど全ての動物細胞に対して、マイクロマニピュレーター等を用いることなく、機能性ナノスファーを一挙かつ大量に、多数の細胞の細胞質内へ、直接導入できる技術開発に成功した。本技術は、細胞膜との融合能を有する膜融合リポソームを用い、エンドサイトーシスによる取り込みではなく、細胞膜との融合により内封ナノスファーを直接細胞質内に導入するものである。この技術により、直径500nmのナノスファーをわずか5分間という短い作用時間で10^5個の細胞のうち87%の細胞に導入することができる。また、30分間の作用では94%以上の細胞に導入することができ、導入されているナノ粒子の平均は1細胞あたり約10個であり、26個以上導入されている細胞群も約5%存在した。さらに本技術を用いてオリゴヌクレオチド吸着ナノスファーを細胞質内へ導入し、細胞質内での徐放化を検討した。その結果、導入直後では、オリゴヌクレオチドがナノスフェアー表面に吸着した状態で細胞内に存在していたが、3日間の培養を行うと、オリゴヌクレオチドがナノスファー表面から解離したことを示す像が観察されはじめ、7日後には、その像が細胞質内で数多く観察されるようになった。以上、膜融合リポソームにより細胞質内に導入されたナノスフェアー表面から、経日的にオリゴヌクレオチドが細胞質に放出、即ち細胞質内での薬物徐放を世界で初めて視覚的に確認したものであり、今後は、作用の面において徐放効果を確認する予定である。
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