研究課題/領域番号 |
13470516
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研究種目 |
基盤研究(B)
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配分区分 | 補助金 |
応募区分 | 一般 |
研究分野 |
病態検査学
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研究機関 | 東京大学 |
研究代表者 |
中原 一彦 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (70101095)
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研究分担者 |
米山 彰子 東京大学, 大学院・医学系研究科, 寄附講座教員 (50175684)
東 克巳 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (50159109)
渡邊 卓 杏林大学, 医学部, 教授 (00191768)
池田 忠子 杏林大学, 医学部, 講師 (90099242)
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研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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キーワード | フローサイトメトリー / 細胞表面抗原 / 抗原量 / 細胞サイズ / FF係数 / 細胞表面抗原の定量化 / 造血器腫瘍 / 臨床応用 |
研究概要 |
本研究はフローサイトメトリー(FCM)の個々の細胞情報を用いて、細胞抗原の解析におけるFCMデータの、より有効な活用法の開発を目的とした。従来、FCMは細胞集団における相対的蛍光強度を測定するに過ぎず、蛍光強度の増減は、細胞抗原量の増減に直結せず、細胞サイズの変化にも大きく左右される結果となっていた。われわれは、横軸にFSC(forward light scatter)、縦軸にFI(fluorescence intensity)をとり、FI/FSC比をFF係数と命名した。このグラフの傾きは個々の細胞表面抗原量の指標となり、FF係数は単位細胞サイズあたりの抗原量の変化率を表す。多くの抗原が直線を描くことが判明し、このことは単位細胞あたりの抗原密度が一定であることを表している。また直線の傾きの変化をみることで蛍光強度の変化が単なる細胞サイズの増大を反映しているだけなのか、実際に抗原量が増大しているかを判別することが可能なことも明らかとなった。さらにFCMのリストモードを活用することにより、こうした解析をコンピュータ上で自動的に行えるソフトを開発した。このソフトを用いて、健常人末梢血リンパ球、また実際の臨床応用として、造血器腫瘍細胞や透析患者のリンパ球について解析した。その結果、より病態に迫る検討が可能なことが示唆された。今後は、より多くの臨床解析と、開発したソフトの標準化、さらに抗原量の定量化を検討する必要がある。
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