細胞膜脂質代謝と脳βアミロイド沈着・神経細胞変性機構の検討

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13480250
• 研究機関: 群馬大学
• 研究代表者: 山口 晴保 群馬大学, 医学部, 教授 (00158114)
• 研究分担者: 柳澤 勝彦 国立長寿医療研究センター, 痴呆疾患研究部, 部長 (10230260) ; 藤田 忍 三菱化学, 生命科学研究所, 主任研究員 ; 佐々木 惇 群馬大学, 医学部, 講師 (80225862) ; 浦上 克哉 鳥取大学, 医学部, 教授 (30213507)
• キーワード: アルツハイマー病 / アミロイド / 痴呆 / アポE / 動物モデル / 脂質ラフト

研究概要

今年度は、ラットとモルモット脳のビブラトーム切片を用いて免疫電顕を行い、細胞内AβとAβの代謝に関わる酵素やタンパクの神経細胞内局在をraftとの関係から検討し、以下の結果を得た。神経細胞内のAβ42の免疫反応は小型小胞、形質膜、細胞質などに認められた。2)3種類のBACE抗体は、いずれも、ERやGolgiに加え、形質膜に点状の反応を示し、flotillinを指標としたraftの染色パターンと良く一致した。3)Herpは、正常脳では神経細胞に存在しているが、アルツハイマー病脳では老人斑に出現するミクログリアで高濃度に発現していた。Herp抗体は神経細胞では形質膜raft様の点状反応を示した。4)GM1結合Aβもraft様の分布パターンを示した。5)以上より、βタンパク産生に関わるタンパクやGM1結合Aβがraftに存在する可能性を示した。
ApoEノックインマウス脳の星形グリアを培養して得たApoE3とApoE4の作用を比較すると、ApoE3の方が細胞膜からコレステロールを抜き取る作用が強いことを示した。
また、ApoEノックインマウスの飼育を開始し、高コレステロール食実験の準備を進めている。さらに、脳虚血に対するApoE3とApoE4ノックインマウスの反応の違いを検討し始めている。ApoEノックインマウスのバッククロスも順調に進んでいる。

研究成果

• [文献書誌] Yamaguchi H et al.: "Alzheimer β amyloid deposition, with is hastened by ApoE ε4 gene, precedes neurofibrillary pathology in the frontal association cortex of non-demented senior subjects."J Neuropathol Exp Neurol. 60巻. 731-739 (2001)
• [文献書誌] Oshima N et al.: "Accumulation of amyloid β-protein in the low-density membrane domain accurately reflects the extent of β-amyloid deposition in the brain"Am J Pathol. 158巻. 2209-2218 (2001)
• [文献書誌] Tanemura K et al.: "Neurodegeneration with tau accumulation in a transgenic mouse expressing V337M human tau"J Neurosci. 22巻. 133-141 (2002)
• [文献書誌] Sun X et al.: "Intracellular Aβ is increaaed by okadaic acid exposure in transfected neuronal and non-neuronal cell lines"Neurobiol Aging. 23巻. 195-203 (2001)
• [文献書誌] Sai X et al.: "Endoplasmic reticulum stress-inducible protein, Herp, enhances presenilin-mediated generation of amyloid β-protein"J Biol Chem. (In press). (2002)
• [文献書誌] Planel E et al.: "Inhibition of protein phosphatase 2A overrides tau protein kinase I/glycogen synthase kinase 3β and cyclin-dependent kinase 5 inhibition and results in tau hyperphosphorylation in the hippocampus of starved mouse"J Biol Chem. 276巻. 34298-34306 (2001)