2001 年度実績報告書

膠原病のゲノム解析:合成多型蛋白とBAC導入マウスによる原因遺伝子の解明

研究課題

研究課題/領域番号	13557018
研究機関	愛媛大学
研究代表者	能勢眞人愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)
研究分担者	宮崎龍彦愛媛大学, 医学部, 助手 (80239384) 小野栄夫愛媛大学, 医学部, 助教授 (20302218) 遠藤弥重太愛媛大学, 工学部, 教授 (40093843) 高橋智筑波大学, 基礎医学系, 教授 (50271896)
キーワード	ポリジーン / リンケージ解析 / 位置的候補遺伝子 / 位置的候補遺伝子 / 合成多型蛋白質 / RI系統マウス / BACコンティグ / 血管炎
研究概要	膠原病は、個々の疾病形質が数多くの原因遺伝子座の影響が合わさった結果として生じていると考えられるポリジーン疾患である。本研究では、個々のポリジーンを同定するための新たな戦術として、C3H/lprマウスを用いたMRL/lpr膠原病モデルマウスのリンケージ解析の成果をもとに、1)感受性遺伝子座の候補遺伝子の合成多型蛋白の機能解析、2)ゲノムモザイクマウスライブラリーを利用した病態ゲノムの解析、3)感受性遺伝子座領域のBAC (bacterial artificial chromosome)トランスジェニックマウスの作成による機能解析、の3項目をプロジェクトとし、今年度は以下の新たな成果を得た。 1)腎炎の位置的候補遺伝子の合成多型蛋白の機能解析:コムギ胚芽リボゾームRNAを用いた無細胞蛋白合成系による蛋白合成系を用いて、遺伝子多型を示した候補遺伝子cDNAのcoding regionを鋳型としてMRL型、C3H型両者の蛋白を合成した。これらの合成多型蛋白の機能を、細胞培養系を用いたバイオアッセイ系にて定性、定量解析し、種々の免疫反応系において両者間に有意な差を見出した。 2)ゲノムモザイクマウスライブラリーの作出:MRL/lprとC3H/lprマウス間の兄妹交配から得られたゲノムモザイクマウスライブラリー(recombinant inbred(RI)系)を3 5系統作成した。F10世代の段階で平均約20 cMをカバーする多型マイクロサテライトマーカーを用いてゲノムワイドスクリーニングを行ったところ、ランダムなゲノムモザイクを有するライブラリーであり、また、この3 5系統中に、血管炎、腎炎のコンジェニック系として使用できる系統も存在していることがわかった。現在、詳細な系統間分布表(SDP表;strain distribution pattern table)を作成中である。 3)血管炎感受性遺伝子座領域のBAC(bacterial artificial chromosome)トランスジェニックマウスの作成:血管炎感受性遺伝子座を中心に、C57BL/6マウスゲノムに由来するBAC contigの解析を行い、BACトランスジェニックに用いるコンストラクトを作成した。また、このcontigについて、特定の候補遺伝子領域にMRLマウスalleleを有するコンストラクトを作成した。

研究成果

(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Yamada M, Takeshita T, Miura S, Murata K, Kimura Y, Ishii N, Nose M, Sakagami H, Kondo H, Tashiro F, Miyazaki JI, Sasaki H, Sugamura K: "Loss of hippocampal CA3 pyramidal neurons in mice lacking STAM1"Mol Cell Biol.. 21. 3807-3819 (2001)
[文献書誌] Kuroda Y, Nakata M, Nose M, Kojima N, Mizuochi T: "Abnormal, IgG galactosylation and arthritis in MRL-Fas^<lpr> of MRL-FASL^<gld> mice are under the control of the MRL genetic background"FEBS Letters. 507. 210-214 (2001)
[文献書誌] Takahashi S, Araki K, Araki M, Ito MR, Nakatani K, Fujii H, Izui S, Vassalli P, Nose M: "Suppression of experimental lupus nephritis by aberrant expression of the solublu E-selectin gene"Pathol Int.. (in press).
[文献書誌] Kamogawa J, Terada M, Mizuki S, Nishihara M, Yamamoto H, Mori S, Abe Y, Morimoto K, Nakatsuru S, Nakamura Y, Nose M: "Arthritis in MRL/lpr mice is under the control of multiple gene loci with an allelic combination derived from the original inbred strains"Arthritis Rheum. (in press).
[文献書誌] Sawasaki T, Oka T, Endo Y: "Liver perchloric acid-soluble ribonuclease"Methods Enzymol. 342. 44-54 (2000)
[文献書誌] Takai T, Ono M: "Activating and Inhibitory nature of the murine paired Immunoglobulin-like receptor family"Immunol Rev.. 181. 215-222 (2001)
[文献書誌] Yuasa T, Ono M, Watanabe T, Takai T: "Lyn is essential for fcgamma receptor III-mediated systemic anaphylaxis but not for the Arthus reaction"J Exp Med.. 193. 563-572 (2001)
[文献書誌] Yoh K, Sugawara T, Motohashi H, Takahama Y, Koyama A, Yamamoto M, Takahashi S: "Transgenic over-expression of MafK suppresses T cell proliferation and function in vivo"Genes Cells. 6. 1055-1066 (2001)
[文献書誌] Yoh K, Itoh K, Enomoto A, Hirayama A, Yamaguchi N, Kobayashi M, Morito N, Koyama A, Yamamoto M, Takahashi S: "Nrf2-deficient female mice develop lupus-like autoimmune nephritis"Kidney Int.. 60. 1343-1353 (2001)

2001 年度 実績報告書

膠原病のゲノム解析:合成多型蛋白とBAC導入マウスによる原因遺伝子の解明

研究代表者

能勢 眞人 愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)

研究成果

[文献書誌] Yamada M, Takeshita T, Miura S, Murata K, Kimura Y, Ishii N, Nose M, Sakagami H, Kondo H, Tashiro F, Miyazaki JI, Sasaki H, Sugamura K: "Loss of hippocampal CA3 pyramidal neurons in mice lacking STAM1"Mol Cell Biol.. 21. 3807-3819 (2001)

[文献書誌] Kuroda Y, Nakata M, Nose M, Kojima N, Mizuochi T: "Abnormal, IgG galactosylation and arthritis in MRL-Fas^<lpr> of MRL-FASL^<gld> mice are under the control of the MRL genetic background"FEBS Letters. 507. 210-214 (2001)

[文献書誌] Takahashi S, Araki K, Araki M, Ito MR, Nakatani K, Fujii H, Izui S, Vassalli P, Nose M: "Suppression of experimental lupus nephritis by aberrant expression of the solublu E-selectin gene"Pathol Int.. (in press).

[文献書誌] Kamogawa J, Terada M, Mizuki S, Nishihara M, Yamamoto H, Mori S, Abe Y, Morimoto K, Nakatsuru S, Nakamura Y, Nose M: "Arthritis in MRL/lpr mice is under the control of multiple gene loci with an allelic combination derived from the original inbred strains"Arthritis Rheum. (in press).

[文献書誌] Sawasaki T, Oka T, Endo Y: "Liver perchloric acid-soluble ribonuclease"Methods Enzymol. 342. 44-54 (2000)

[文献書誌] Takai T, Ono M: "Activating and Inhibitory nature of the murine paired Immunoglobulin-like receptor family"Immunol Rev.. 181. 215-222 (2001)

[文献書誌] Yuasa T, Ono M, Watanabe T, Takai T: "Lyn is essential for fcgamma receptor III-mediated systemic anaphylaxis but not for the Arthus reaction"J Exp Med.. 193. 563-572 (2001)

[文献書誌] Yoh K, Sugawara T, Motohashi H, Takahama Y, Koyama A, Yamamoto M, Takahashi S: "Transgenic over-expression of MafK suppresses T cell proliferation and function in vivo"Genes Cells. 6. 1055-1066 (2001)

[文献書誌] Yoh K, Itoh K, Enomoto A, Hirayama A, Yamaguchi N, Kobayashi M, Morito N, Koyama A, Yamamoto M, Takahashi S: "Nrf2-deficient female mice develop lupus-like autoimmune nephritis"Kidney Int.. 60. 1343-1353 (2001)

2001 年度実績報告書

能勢眞人愛媛大学, 医学部, 教授 (70030913)