| 研究課題/領域番号 |
13557079
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| 研究機関 | 聖マリアンナ医科大学 |
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研究代表者 |
長田 賢一 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 講師 (20233504)
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| 研究分担者 |
松井 宏晃 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 教授 (90181685)
朝倉 幹雄 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (70103504)
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| キーワード | BHLH / 気分安定薬 / リチウム / GAP-43 / 転写因子 / Math / E-box / ゲルシフトアッセイ |
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| 研究概要 |
気分安定薬(リチウム、カルバマゼピン)の共通する機構として、ノルアドレナリン、セロトニンなどの神経伝達物質の分泌を調節しているGAP-43のリン酸化が増加することを報告した。さらにリチウム長期投与後GAP-43の発現が増加し蛋白量も増加していることを報告した。このGAP-43の発現はbHLH (helix-loop-helix)転写調節因子がGAP-43のプロモターのE-boxと結合し調節されているとの報告がある。そこで今回は、気分安定薬としてリチウムにより変化するbHLH転写調節因子を見つけだし、GAP-43の発現調節機構を検討した。
リチウム慢性投与のラット大脳皮質でのイムノブロットによるGAP-43の定量では、リチウム投与4週後では50%、5週後では55%と有意に増加していた。GAP-43のRNA量も蛋白量と同様に、4週後、5週後では蛋白量とほぼ同程度増加しており、5週後では51%有意に増加していた。さらに、リチウムによるE-box結合蛋白質の変化をゲルシフトアッセイ法にて検出した。リチウム慢性投与後のE-box結合蛋白とプロープとの結合はリチウム投与4週後で20%、5週後で60%の減少をみとめた。次にこのE-box結合蛋白の同定のため各抗体を添付しDNAとE-box結合蛋白の結合が抑制されるかを検討した結果このE-box結合蛋白がMathである可能性が考えられた。従ってMathがリチウムにより変化しE-boxと結合が減少し、転写活性が誘発されGAP-43RNAが増加し、GAP-43蛋白量も増加したと考えられる。今後Math転写因子とGAP-43の発現の関係を検討するため、Math-geneを神経細胞にトサンスフェクトしGAP-43m-RNAの発現を確認する。
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