| 研究課題/領域番号 |
13557096
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| 研究種目 |
基盤研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 展開研究 |
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| 研究分野 |
外科学一般
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| 研究機関 | 千葉東病院 (2002-2003)
千葉大学 (2001) |
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研究代表者 |
剣持 敬 千葉東病院, 臨床研究部, 研究員 (50215133)
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| 研究分担者 |
丸山 通広 国立佐倉病院, 臨床研究部, 研究員
西郷 健一 国立佐倉病院, 臨床研究部, 研究員 (60323424)
坂本 薫 国立佐倉病院, 臨床研究部, 室長 (30360689)
山田 研一 国立佐倉病院, 臨床研究部, 部長
ASANO Takehide Chiba Cancer Center, Department of Gastoenteral surgery, Head
WATANABE Satomi Sakura National Hospital, Institute of Clinical Research, Researcher
AKATSU Naotake University Hospital, Department of Surgery II, Medical Stuff
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2003
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| キーワード | 膵島移植 / 膵島分離 / 遺伝子導入 / Lipofection法 / 臨床膵島移植 |
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| 研究概要 |
研究1.「Polyamine transfection reagentsを用いたラット膵島への遺伝子導入の基礎的研究」:ラットより膵島を分し,遺伝子導入を行った。導入はリポソーム法で行い,Polyamine transfection reagentsを使用し,導入VectorはpZeoSV2/lacZを用いた。遺伝子導入後もラ島の構築は良好に保たれ,各群ともにDithizone染色にて良好な染色性を示した。遺伝子導入効率は90%以上を示した。リポソーム法にてラ島への効率的な遺伝子導入の可能性が確認され,遺伝子導入に際し,有効と考えられた。
研究2.「イヌ膵島への効率的遺伝子導入法に関する基礎的研究」:ビーグル犬膵島に蛍光発色性のあるpCMS-EGFPを、以下にて遺伝子導入した。1)遺伝子銃、2)電気穿孔法、3)Lipofection法。導入効率はLipofection法で95%と遺伝子銃の35%、電気穿孔法の43%に比較し良好であった。遺伝子銃、電気穿孔法では膵島数、インスリン含有量の著明な減少がみられたのに対し、Lipofection法では非遺伝子導入膵島と同程度に膵島数、インスリン含有量が保たれLipofection法の低障害性が示された。
研究3.「当院で施行した臨床膵島分離・凍結保存・膵島移植症例の検討」:平成15年9月12日〜平成16年7月末までに8例の膵島分離を行った。脳死ドナー1例、心停止ドナー7例であった。膵島収量は18,693-491,040IEQ、純度は30-80%であった。分離膵島はすべて機能を有していた。うち1例が新鮮膵島移植に使用された。移植後は合併症無く、血糖コントロールの改善と低血糖発作の消失、インスリン使用量の減少が得られ、高感度C-peptide値は0.05→0.4ng/mlと上昇した。インスリン離脱は得られなかったが患者QOLの著明な改善がみられた。
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