子宮頸部細胞外基質代謝の生化学的解析に基づく頸部熟化調節薬の開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13557139
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 佐川 典正 京都大学, 医学研究科, 助教授 (00162321)
• 研究分担者: 広田 直美 日本オルガノン(株), 医薬研究所, 研究開発管理室長 ; 刈谷 方俊 京都大学, 医学研究科, 講師 (90243013) ; 伊東 宏晃 京都大学, 医学研究科, 助手 (70263085) ; 和田 幸久 日本オルガノン(株), 医薬研究所, 研究員
• キーワード: 子宮頸部線維芽細胞 / 子宮頸部熱化 / matrix metalloproteinase / prostadlandin / 一酸化窒素 / interleukin-1 / 周期的伸展刺激 / interleukin-8

研究概要

まず妊娠ヒト子宮頸部組織および培養ヒト子宮頸部線維芽細胞(CxF細胞)を用いて、各種matrix metalloproteinases(MMPs)発現に対するprostadlandin F2α(PGF2α)、PGE2、一酸化窒素(NO)およびサイトカインの影響を検討した。ヒト妊娠子宮頸部組織ではWestern blot法、zymography法、免疫染色法でMMP-1、MMP-2の発現が確認されたが,MMP-9は検出感度以下であった。また、CxF細胞におけるMMP-1の分泌はPGF2α(10^<-6>〜10^<-5>M)、IL-1α(0.01〜1ng/ml)、SNP(10^<-6>〜10^<-4>M)D-NO(10^<-5>〜10^<-4>M)の24時間添加により、各々対照の最大3.4倍、4.5倍、3.0倍まで用量依存性に増加し、mRNA発現も亢進していた。
つぎに、分娩時の胎児先進部による子宮頸部への周期的伸展刺激が、MMPsおよびIL-8分泌にどのような影響を有するかを、Flexcell 3000 systemを用いて検討した。伸展刺激により、CxF細胞からのMMP-1およびIL-8の分泌はそれぞれ基礎分泌の平均3.0倍、2.3倍に増加し(n=3,P<0.05)、MMP-1 mRNA発現の亢進を認めた。MMP-9は検出感度以下で、MMP-2は変化しなかった。伸展刺激によるMMP-1、IL-8の分泌増加作用は、activator protein-1の阻害剤であるcurcumin(5〜50μM)の添加によって用量依存的に抑制された。
以上より、分娩時の子宮頸部線維芽細胞からのMMP-1分泌にはIL-1αおよびNOが関与している可能性が示唆された。また、陣痛による周期的伸展刺激は、AP-1を介して子宮頸部線維芽細胞からのMMP-1、IL-8の分泌を促進し、子宮頸部熟化に寄与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Takuya Inoue, et al.: "Severe congenital cytomegalovirus infection with fetal hydrops in a cytomegalovirus-seropositive healthy woman"European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology. 195. 184-186 (2001)
• [文献書誌] Masahiro Yoshida, et al.: "Nitric oxide increases matrix metalloproteinase-1 production in human uterine cervical fibroblast cells -Nitric oxide as a possible mediator of uterine cervical ripening-"Molecular Human Reproduction. 7. 979-985 (2001)
• [文献書誌] Koichi Terakawa, et al.: "Site-specific Augmentation of Amnion Cyclooxygenase-2 and Decidua Vera Phospholipase-A_2 Expression in Labor : Possible Contribution of Mechanical Stretch and Interleukin-1 to Amnion Prostaglandin Synthesis"Journal of the Society for Gynecologic Investigation. (in press). (2002)
• [文献書誌] Norimasa Sagawa, et al.: "Role of Leptin in Pregnancy-A Review-"Trophoblast Research. 23(in press). (2002)
• [文献書誌] 佐川 典正: "産婦人科領域におけるレプチンの意義"日本産婦人科学会雑誌. 53・8. 1686-1692 (2001)
• [文献書誌] 佐川 典正: "羊膜の生物学"周産期医学. 31・5. 1007-1014 (2001)
• [文献書誌] Norimasa Sagawa, et al.: "Placental Protein and Fetal Growth In : Proceedings of 12^<th> Fukuoka International Symposium on Perinatal Medicine, (pp. 59-65)"Maternity and Perinatal Care Unit Kyushu University Hospital. 7 (2001)