ベンゾ〔d〕ピレン及びその代謝物の内分泌撹乱作用の評価法に関する研究

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13558066
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 鳥羽 陽 金沢大学, 薬学部, 助手 (50313680)
• 研究分担者: 木津 良一 金沢大学, 大学院・自然科学研究科, 助教授 (80143915) ; 早川 和一 金沢大学, 薬学部, 教授 (40115267)
• キーワード: ベンゾ[a]ピレン / ヒドロキシベンゾ[a]ピレン / 多環芳香族炭化水素 / 1-ヒドロキシピレン / 内分泌撹乱作用 / 代謝物 / 喫煙

研究概要

ベンゾ[a]ピレン(BaP)の代謝物として知られているモノヒドロキシベンゾ[a]ピレン(OHBaP)の水酸基の位置の異なる異性体12種について、酵母のヒトエストロゲンレセプターに応答したβ-ガラクトシダーゼの発現系を用いた実験を行った。その結果、3-OHBaPがビスフェノールAに匹敵する強さのエストロゲン様活性を有することを見いだした。このことから、Bapの内分泌かく乱作用の全容を明らかにするためには、代謝物を含めたBaP関連化合物の生体試料中濃度からヒトのBaPの暴露量を把握すること、及びそれらから内分泌撹乱の可能性を推定することが不可欠であると考えられた。そこで、生体試料中のBaP代謝物のモニタリング法の開発を行った。また、多環芳香族炭化水素(PAHs)曝露の指標としての1-ヒドロキシピレン(1-OHP)の分析法も同時に開発した。OHBaPsについては、HPLC-蛍光検出法による分析法を開発した。アルキルアミド型逆相カラムにより、8種類のOH-BaPを分離し、分離が不十分な1-,3-,12-OH-BaPをカラムスイッチングによりβ-シクロデキストリン固定化カラムに導入することで分離した。また、1-OHPについては、重水素化1-OHPを内標準物質として用いるHPLO-蛍光検出法を開発した。尿試料は、抱合体を加水分解した後、固相抽出またはブルーレーヨンを用いて濃縮し検液とした。その結果、OHBaPの異性体の中でエストロゲン様活性を有する3-OHBaPを健常人の尿中から検出した。また1-OHPについては、PAHsの摂取源の一つである喫煙の影響を検討したところ、喫煙者でその尿中濃度が有意に高く、曝露指標になることが分かった。以上の結果から、生体内でエストロゲン様活性を有するBaP代謝物が生成し、尿中に排泄され、また喫煙によってその曝露量が増加することが明らかとなった。

研究成果

• [文献書誌] Chetiyanukornkul, T., Toriba, A., Kizu, R., Hayakawa, K., et al.: "Determination of 1-Hydroxypyrene in Human Urine by High-performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detection Using a Deuterated Internal Standard"J. Chromatogr. A. (2002)
• [文献書誌] 唐 寧, 小操征司, 渡辺有梨, 鳥羽 陽, 木津良一, 早川和一et al.: "ウラジオストク,富山及び金沢における大気中多環芳香族炭化水素の比較"日本海域研究. 33. (2002)
• [文献書誌] Tang, N., Mishukov, V. F., Sergienko, V., Toriba, A., Kizu, R., Hayakawa, K., et al.: "Comparison of Atmospheric Nitropolycyclic Aromatic Hydrocarbons in Vladivostok, Kanazawa and Toyama"J. Health Sci.. 48(1). 1-7 (2002)
• [文献書誌] Hirose, T., Kizu, R., Toriba, A., Hayakawa, K., Masamune, Y, et al.: "Estrogenic/Antiestrogenic Activities of Benzo[a]pyrene Monohydroxy Derivatives"J. Health Sci.. 47(6). 552-558 (2001)
• [文献書誌] Hayakawa, K., Noji, K., Tang, N., Toriba, A., Kizu, R.: "A High-Performance Liquid Chromatographic System Equipped with Reducer and Concentrator Columns for Determination of Trace Levels of Nitropolycyclic Aromatic Hydrocarbons in Extracts from Diesel-Engine Exhaust Particulates"Anal. Chim. Acta. 445. 205-212 (2001)
• [文献書誌] Kakimoto, H., Toriba, A., Kizu, R., Hayakawa, K., et al.: "Considerations of Atmospheric Behaviors of Polycycilic Aromatic Hydrocarbons, Nitropolycyclic Aromatic Hydrocarbons and Inorganic Pollutants Based on Their Interrelationships"J. Health Sci.. 47(4). 385-393 (2001)