ヒ素耐性化につながるリン酸輸送体の解明

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13640657
• 研究機関: 東京薬科大学
• 研究代表者: 藤原 祥子 東京薬科大学, 生命科学部, 講師 (30266895)
• 研究分担者: 貝瀬 利一 東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (20266894) ; 都筑 幹夫 東京薬科大学, 生命科学部, 教授 (70155430)
• キーワード: ヒ素耐性 / リン酸輸送体 / ヒ酸 / クラミドモナス / 緑藻

研究概要

申請者らはこれまでに、遺伝子タギング法により緑藻Chlamydomonasのヒ酸耐桂株(AR3)を作製し、この株では野生株と比べてリン酸の取り込みは高いが、リン酸と化学的性質の似ているヒ酸の取り込みはすく抑制されることを明らかにしてきた。また、原因遺伝子(PTB1)が酵母のNa^+/phosphate cotransporterをコードするPHO89遺伝子と相同性を示すこと、またPTB1ホモログであるPTB2のmRNA量がAR3では野生株より増加しており、これによりリン酸の取り込みが増加していることも明らかにしてきた。今年度は、新たにヒ酸耐性株(ARb-ARf)を作製し、その性質について検討を行った。生育阻害ヒ酸濃度は、野生株が1mM、AR3が20mM程度であったのに対して、ARb、ARc、AReは5mM程度、ARd、ARfは20mM程度であった。そこで、中間的な耐性度を示したARb株とARc株について野生株と戻し交配を行い、得られた株についてヒ酸の取り込みとリン含量の測定を行った。これらの株のヒ酸の取り込みは野生株と同程度か野生株とAR3の中間的な価を示したのに対し、リン含量はAR3と同様野生株より高い価を示した。これらのことから、ヒ酸耐性には高いリン含量と低いヒ酸取り込みの両方が重要な役割を果たしていることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Isao Kobayashi: "Insertional mutagenesis in a homologue of a Pi transporter gene confers arsenate resistance on Chlamydomonas."Plant Cell Physiol.. 44・6. 597-606 (2003)
• [文献書誌] Shoko Fujiwara: "Molecular phylogenetic relationships between prostanoid-containing Okinawan soft coral, Clavularia viridis, and non prostanoid-containing Clavularia species based on the ribosomal ITS sequences."Mar.Biotechnol.. 5. 401-407 (2003)
• [文献書誌] Masahiko Imashimizu: "Thymine at -5 is crucial for cpc promoter activity of Synechocystis sp.PCC 6714."J.Bacteriol.. 85・21. 6477-6480 (2003)
• [文献書誌] Motoya Suzuki: "Isolation of peridinin-related norcarotenoids with cell growth-inhibitory acuvity from the cultured dinoflagellate of Symbiodinium sp., a symbiont of the Okinawan soft coral Clavularia viridis, and analysis of fatty acids of the dinoflagellate."Chem.Pharm.Bull.. 51. 724-727 (2003)
• [文献書誌] Naoko Hashimoto: "Localization of prosranoids with antitumor activity, clavulones, within Okinawan soft coral Clavularia viridis (Alcyonacea, Clavulariidae) : Preparation of a high-purity Symbiodinium fraction using a protease and a detergent."Lipids. 38・9. 991-997 (2003)