研究課題/領域番号 |
13640661
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研究機関 | 東京大学 |
研究代表者 |
馳澤 盛一郎 東京大学, 大学院・新領域創成科学研究科, 教授 (40172902)
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研究分担者 |
近藤 矩朗 東京大学, 大学院・理学系研究科, 教授 (60124343)
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キーワード | 微小管 / 細胞周期 / GFP / 細胞同調 / タバコBY-2細胞 / 液胞 / TVM / AtVam3p |
研究概要 |
高等植物細胞に特徴的な表層微小管は細胞の形態形成において主要な役割を担っていることが知られている。今年度の成果としては、デコンボリューション顕微鏡を用いて細胞の中央から表層までを経時観察したところ、フラグモプラストの崩壊に伴って娘核の核膜近くに蛍光が集積し、その後核膜表面から太い微小管の束が伸長して細胞表層に達した時点で蛍光輝点を形成することが分かった。また共焦点レーザー顕微鏡を用いて細胞表層の経時観察を行い、細胞長軸に平行な微小管が出現してからそれと垂直な微小管が出現するまでの移行過程についても観察した。その結果、核膜表面の微小管派生から表層微小管の完成までの統合的理解が可能になった(Yoneda & Hasezawa submitted)。 また、我々は高等植物細胞の形態形成における液胞の寄与についても研究を行った。詳細な経時観察のため、シロイヌナズナのsyntaxinファミリーに属するAtVam3pとGFPの融合タンパク質を恒常的に発現するタバコBY-2細胞の形質転換株BY-GV(transgenic BY-2 cells stably expressing GFP-AtVam3p fusion protein)を確立した。このBY-GV細胞を用いて、共焦点レーザー顕微鏡によって得られた連続光学切片をもとに、新規に独自で開発した立体画像構築ソフトSSRによる立体画像構築とモデリングを行った。その結果、TVM(tubular structure of vacuolar membrane)を含む液胞構造の立体的な構成と、細胞周期の進行に伴う動態の全容が明らかになった(Kutsuna et al. in preparation)。
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