| 研究課題/領域番号 |
13660007
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
村田 稔 岡山大学, 資源生物科学研究所, 教授 (20166292)
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| 研究分担者 |
小倉 豊 岡山大学, 資源生物科学研究所, 助手 (60224193)
坂本 亘 岡山大学, 資源生物科学研究所, 助教授 (20222002)
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| キーワード | ライムギ / ミジェット染色体 / コムギ / マイクロダイセクション / 細胞質雄性不稔 / DOP-PCR |
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| 研究概要 |
本研究では、ライムギの細胞質を有する六倍性コムギ(cereale)-Chinese Spring(CS)に特異的に存在する小型染色体(midget)の分子構造をマイクロダイセクション法により詳細に解析し、座乗する遺伝子群を同定、解析することを目的としている。現在まで、試験的にコムギのダイテロソーミックスを用いて、特異的なテロ染色体1BSをマイクロダイセクションすることを試みた。その結果、掻き取った1BS染色体10本からDNAを増幅することに成功した。これまでは、ギムザ染色をした染色体標本を用いていたが、コンタミネーションなどの問題も生じたため、無染色の標本を用いた。DNAの増幅は、DOP-PCR.によったが、市販されているキットでは十分な増幅が得られなかったため、数種のTaq DNAポリメラーゼを用いて、最適条件を検討した。その結果、Fast Taq DNAポリメラーゼがDOP-PCRに最も適していることが示された。これまでの解析から、増幅したDNA断片には、ESTや既知遺伝子のコーディング領域とホモロジーを示す配列がかなりの割合で含まれていることがわかった。現在は、同様の方法を用いて、ミジェット染色体のマイクロダイセクションを行っている。しかし、染色体が1BS染色体よりもさらに小型であるため、無染色の標本ではこの染色体を同定することが困難である。現在は、蛍光染色した標本の有効性を検討している。
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