| 研究課題/領域番号 |
13660084
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| 研究機関 | 東京工業大学 |
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研究代表者 |
宍戸 和夫 東京工業大学, 大学院・生命理工学研究科, 教授 (40087549)
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| 研究分担者 |
山崎 丘 東京工業大学, 大学院生命理工学研究科, 助手 (70301174)
梶原 将 東京工業大学, 大学院生命理工学研究科, 助教授 (10272668)
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| キーワード | 担子菌 / 子実体形成 / DNA結合性 / 転写因子 / 標的遺伝子 / タンパク質間相互作用 / 細胞接着 |
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| 研究概要 |
シイタケの子実体形成のトリガーはAキナーゼを活性化するcAMPであり、Aキナーゼがリン酸化するタンパク質としてDNA結合性の転写因子PRIBとLe.CDC5がある。PRIBはZn(II)2Cys6ジンククラスターとbZIPモチーフを持ち、16 bp 5' -GGGGGGGACAGGANCC-3'がコンセンサス配列である。Le.CDC5はMYBドメインを有し、7 bp 5' -GCAATGT-3' /5' -ACATTGC-3'がコンセンサス配列である。priBとLe. cdc5遺伝子は子実体形成初期においてとりわけ高程度に発現している。mfbA遺伝子は子実体の成熟期において高程度発現する遺伝子で、MFBAタンパク質は細胞接着に関わるRGD配列の他にPHDフィンガーおよびSETドメインを持っている。本研究により、これら3種類のタンパク質についてさらに以下の知見が得られた。(1)PRIBが作用する標的遺伝子としてpriB, uck1(UMP-CMPキナーゼ)、出芽酵母YJ40ホモログの3つの遺伝子が分離された。priBが分離されたことは本遺伝子が自己調節されていることを意味する。YJ40タンパク質の機能は不明であるが、出芽酵母26SプロテアソームのSEN3タンパク質にある程度の相同性が認められた。(2)Le. CDC5が作用する標的遺伝子を含むDNA断片が2種類(3.7kbと3.9kb)分離された。3.7kb断片の全塩基配列を解析した結果、真核生物で金属耐性・多剤耐性に関わるタンパク質ホモログ遺伝子の下流に、Le. CDC5結合配列に類似の配列をプロモーター領域に持つ新規遺伝子が存在することが分かった。(3)MFBAタンパク質のPHDフィンガーを含む断片が7 bp 5' -ANAAGGT-3'に結合すること、MFBAがSETドメインを介してホモあるいはヘテロ二量体を形成することが分かった。
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