| 研究課題/領域番号 |
13660308
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| 研究機関 | 北里大学 |
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研究代表者 |
打出 毅 北里大学, 獣医畜産学部, 講師 (20327456)
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| 研究分担者 |
天間 恭介 北里大学, 獣医畜産学部, 教授 (50050654)
斉田 要 産業技術総合研究所, 分子細胞, 主任研究官
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| キーワード | ウシ / エンドセリン2 / 血管作動性腸管収縮ペプチド / クローニング / 卵巣 |
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| 研究概要 |
血管作動性腸管収縮ペプチド(VIC)はエンドセリン(ET)ファミリーに属するペプチドであり、ヒトやイヌのET-2に対応するペプチドと考えられている。我々は、ET-2およびVICの生理学的役割をマウスを実験モデルとして検討してきた結果、卵巣機能と密接な関係がある事を示した。そこで、本研究では、このマウスにおけるVICの基礎研究を基にし、ウシ卵巣におけET-2/VICの役割の解明を試みる。牛では、卵巣疾患に由来する繁殖障害が多く見られ、ウシの卵巣を題材とすることは獣医学上意義が大きい。
本年度は昨年度の研究成果を基に、ウシET-2遺伝子の臓器における発現解析を中心に行った。
1)クローニングで得られた全長cDNAの塩基配列情報を基にしてprimerを設計し、ウシの臓器(心、肺、肝、腎、脾、弟1胃、弟4胃、12指腸、結腸、子宮、卵巣)におけるET2mRNAの発現解析をRT-PCRによって行ったところ、脾臓以外の臓器で発現が確認された。
2)ウシET-2mRNAの定量法の検討をReal time RT-PCR法により行った。増幅効率およびdynamic rangeを指標にPrimerやTaqMan Probeの設計を行い、増幅効率80%以上、dynamic range 10^6以上のsystemが得られた。現在このsystemを用いて臓器におけるウシET-2mRNAの定量解析を行っている。
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