2002 年度実績報告書

腸管幹細胞を用いた胃腸膵内分泌細胞の再生と遺伝子治療の為の基礎的研究

研究課題

研究課題/領域番号	13670010
研究機関	滋賀医科大学
研究代表者	藤宮峯子滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (10199359)
研究分担者	中村高秋滋賀医科学大学, 医学部, 助手 (30314157)
キーワード	腸管幹細胞 / 遺伝子導入 / Pdx-1 / 腸管内分泌細胞 / β細胞
研究概要	平成13年度の研究で、ラット腸管上皮由来のIEC-6細胞に膵β細胞への分化誘導遺伝子pdx-1を導入して、chromograin A, serotonin, somatostatin, CCK, gastrin, pp等を産生する内分泌細胞に分化させることに成功した。平成14年度の研究では、この細胞をインスリンを産生するβ細胞に分化させる事を試みた。IEC-6細胞にpdx-1遺伝子を導入した細胞に、膵β細胞の栄養因子であるベータセルリンを作用させると、培養液中のインスリン濃度が上昇し、インスリン抗体で陽性に染色される細胞が出現した。この時に、細胞で発現する各種転写因子をRT-PCRで検原すると、Neuro D, Nkx6.1, Pax6以外にIslet-1(ISL-1)の発現が認められた。すなわち、インスリン産生能を持たない細胞ではNeuro D, Nkx6.1,Pax6が発見したがインスリン産生能を持つと同時にISL-1遺伝子を発現するようになった。このことより、ISL-1遺伝子がβ細胞の分化に必須の遺伝子であることが判明した。次に、Pdx-1とISL-1をdouble transfectionした細胞でインスリンの産生能を調べたが、予想どおりインスリンに特有な顆粒を持つβ細胞が得られた。この細胞をラットの腹腔内に投ずると、血糖のコントロールを行うことがわかった。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] S.Yamada, H.Kojima, M.Fujimiya, T.Nakamura, 他: "Differentiation of immature enterocytes into enteroendocrine cells by Pdx1 overexpression"Am. J. Physiology Gastrointestinal Liver Physiol. 281. G229-G236 (2001)
[文献書誌] H.Kojima, T.Nakamura, A.Kishi, M.Fujimura, 他: "Combined Expression of Pancreatic Duodenal Homeobox 1 and Islet Factor 1 Induces Immature Enterocytes to Produce Insulin"Diabetes. 51. 1398-1408 (2002)
[文献書誌] N.Ueno, A.Inui, A.Asakawa, H.Yuzuri, M.Kasuga, W.Fujimiya: "Impaired glucose tolerance in pancreatic polypeptide-overexpressing mice"Diaketologia. 45. 108-1049 (2002)
[文献書誌] H.Imaeda, H.Yamamoto, A.Takai, M.Fujimiya: "In vivo response of neutrophils and epithelial sells to lipopolysaccharide into the monkey ileum"Histochem. Cell. Biology. 118. 381-388 (2002)
[文献書誌] T.Okuno, A.Ando, S.Bamba, M.Fujiya他: "Interleukin-1β and tumor necrosis factor-α induce chemokine and matrix metalloproteinase gene expression in human colonic subepithelial myofibroblasts"Scand. J. Gastroenterology. 37. 317-324 (2002)
[文献書誌] Y.Chino, M.Fujimura, K.Kitahama, M.Fujimiya: "Colocalization of NOS and VIP in neurons of the submucous plexus in the rat intestine"Peptides.. 23. 2245-2250 (2002)
[文献書誌] A.Kuwahara, M.Fujimiya: "Biology of the intestine in growing animals"Elseviver. 46 (2002)

2002 年度 実績報告書

腸管幹細胞を用いた胃腸膵内分泌細胞の再生と遺伝子治療の為の基礎的研究

研究代表者

藤宮 峯子 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (10199359)

研究成果

[文献書誌] S.Yamada, H.Kojima, M.Fujimiya, T.Nakamura, 他: "Differentiation of immature enterocytes into enteroendocrine cells by Pdx1 overexpression"Am. J. Physiology Gastrointestinal Liver Physiol. 281. G229-G236 (2001)

[文献書誌] H.Kojima, T.Nakamura, A.Kishi, M.Fujimura, 他: "Combined Expression of Pancreatic Duodenal Homeobox 1 and Islet Factor 1 Induces Immature Enterocytes to Produce Insulin"Diabetes. 51. 1398-1408 (2002)

[文献書誌] N.Ueno, A.Inui, A.Asakawa, H.Yuzuri, M.Kasuga, W.Fujimiya: "Impaired glucose tolerance in pancreatic polypeptide-overexpressing mice"Diaketologia. 45. 108-1049 (2002)

[文献書誌] H.Imaeda, H.Yamamoto, A.Takai, M.Fujimiya: "In vivo response of neutrophils and epithelial sells to lipopolysaccharide into the monkey ileum"Histochem. Cell. Biology. 118. 381-388 (2002)

[文献書誌] T.Okuno, A.Ando, S.Bamba, M.Fujiya他: "Interleukin-1β and tumor necrosis factor-α induce chemokine and matrix metalloproteinase gene expression in human colonic subepithelial myofibroblasts"Scand. J. Gastroenterology. 37. 317-324 (2002)

[文献書誌] Y.Chino, M.Fujimura, K.Kitahama, M.Fujimiya: "Colocalization of NOS and VIP in neurons of the submucous plexus in the rat intestine"Peptides.. 23. 2245-2250 (2002)

[文献書誌] A.Kuwahara, M.Fujimiya: "Biology of the intestine in growing animals"Elseviver. 46 (2002)

2002 年度実績報告書

藤宮峯子滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (10199359)