2002 年度実績報告書

チミジンホスホリラーゼ・ウリジンホスホリラーゼダブルノックアウトマウスの解析

研究課題

研究課題/領域番号	13670149
研究機関	鹿児島大学
研究代表者	原口みさ子鹿児島大学, 医学部, 助手 (10244229)
キーワード	チミジンホスホリラーゼ / ウリジンホスホリラーゼ / ダブルノックアウトマウス / ミトコンドリア / MNGIE / 血管新生
研究概要	チミジンホスホリラーゼ(TP)/ウリジンホスホリラーゼダブルノックアウトマウスを作製した。このマウスは体内のTP活性がなく血中のチミジン濃度が野生型マウスにくらべ5倍高かった。しかしながら正常に生まれ外見上異常はなく生殖能力もあった。ヒトではTP活性の欠損が原因でMNGIEというミトコンドリア病が発症する。このマウスはMNGIEの特徴である骨格筋の形態異常、サイトクロムCオキシダーゼの欠損、ragged redfiber、ミトコンドリア変化はなかった。(1)しかしながら脳をMRIで撮像するとMNGIEの患者100%にみられる白室脳症に類似した変化-すなわちT2マップで白質の脳室周囲部に高シグナルを示す部分がみられた。(2)画像上の白質の変化に対応する病理像を電子顕微鏡下で観察したところ、ダブルノックアウトマウスで径の増大した有髄線維がみられた。腫大した有髄線維は形態的にも不整型を呈し、neurofilamentの密度が高く運動神経疾患の早期にみられる病理変化と類似していた。神経線維でも血管内皮でもミトコンドリアの異常はみられなかった。(3)これらのマウスの脳のmtDNAの欠乏、欠損などサザンブロット、PCRで調べたが変化はみられなかった。以上の結果よりダブルノックアウトマウスの脳に見られる白室脳症に類似した変化はneurofilamentの蓄積による有髄線維の腫大でおこる可能性がありミトコンドリアの異常を介するものではないことがわかった。ダブルノックアウトマウスは麻酔薬に対し感受性が高く覚醒までの時間が2倍程度であった。発生時の血管新生には差が見られなかった。腫瘍移植時の血管新生に差があるかを調べるために現在マウスの遺伝背景をBalb/cに変えているところである。また野生型マウスとの問で造腫瘍性に差がみられるか調べるために癌を好発するMMTV-Ha-Rasのトランスジェニックマウスと交配しておりダブルノックアウト/MMTV-Ha-Rasのマウスを作製した。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Ikeda-R: "Thymidine phosphorylase inhibits apoptosis induced by cisplatin"Biochem-Biophys-Res-Commun.. 301(2). 358-363 (2003)
[文献書誌] Ren, -X-Q: "A positively charged amino acid proximal to the C-terminus of TM17 of MRP1 is indispensable for GSH-dependent binding of substrates and for transport of LTC4"Biochemistry. 41(48). 14132-14140 (2003)
[文献書誌] Ikeda-R: "Molecular basis for the inhibition of hypoxia-induced apoptosis by 2-deoxy-d-ribose"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 291. 806-812 (2003)
[文献書誌] Uchimiya-H: "Suppression of thymidine phosphorylase-mediated angiogenesis and tumor growth by 2-deoxy-L-ribose"Cancer Res.. 62. 2834-2839 (2002)
[文献書誌] Haraguchi-M.: "Targeted Deletion of both Thymidine Phosphorylase and Uridine Phospshorylase and consequent disorders in mice"Mol. Cell. Biol.. 22. 5212-5221 (2002)
[文献書誌] Furukawa-T.: "Thymidine Phosphorylase, a new molecular target for anti-cancer therapy"Current Topics in Biochemical Res.. 4. 89-95 (2001)

2002 年度 実績報告書

チミジンホスホリラーゼ・ウリジンホスホリラーゼダブルノックアウトマウスの解析

研究代表者

原口 みさ子 鹿児島大学, 医学部, 助手 (10244229)

研究成果

[文献書誌] Ikeda-R: "Thymidine phosphorylase inhibits apoptosis induced by cisplatin"Biochem-Biophys-Res-Commun.. 301(2). 358-363 (2003)

[文献書誌] Ren, -X-Q: "A positively charged amino acid proximal to the C-terminus of TM17 of MRP1 is indispensable for GSH-dependent binding of substrates and for transport of LTC4"Biochemistry. 41(48). 14132-14140 (2003)

[文献書誌] Ikeda-R: "Molecular basis for the inhibition of hypoxia-induced apoptosis by 2-deoxy-d-ribose"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 291. 806-812 (2003)

[文献書誌] Uchimiya-H: "Suppression of thymidine phosphorylase-mediated angiogenesis and tumor growth by 2-deoxy-L-ribose"Cancer Res.. 62. 2834-2839 (2002)

[文献書誌] Haraguchi-M.: "Targeted Deletion of both Thymidine Phosphorylase and Uridine Phospshorylase and consequent disorders in mice"Mol. Cell. Biol.. 22. 5212-5221 (2002)

[文献書誌] Furukawa-T.: "Thymidine Phosphorylase, a new molecular target for anti-cancer therapy"Current Topics in Biochemical Res.. 4. 89-95 (2001)

2002 年度実績報告書

原口みさ子鹿児島大学, 医学部, 助手 (10244229)