2002 年度実績報告書

活性酸素種・NOによる増殖因子誘導とプロセシングを介した動脈硬化発症機序の解明

研究課題

研究課題/領域番号	13670151
研究機関	兵庫医科大学
研究代表者	鈴木敬一郎兵庫医科大学, 医学部, 教授 (70221322)
研究分担者	江口裕伸兵庫医科大学, 医学部, 助手 (60351798) 大河原知水兵庫医科大学, 医学部, 講師 (50330452)
キーワード	一酸化窒素 / 動脈硬化 / 過酸化物 / HB-EGF / 血管平滑筋 / JNK / アポトーシス
研究概要	一酸化窒素(NO)は血管拡張、神経伝達など多彩な生理作用のある一方、peroxynitriteを介して細胞障害性も有し、血管系に対し酸化ストレスを与える。一方、ヘパリン結合性EGFF様増殖因子(HB-EGF)は血管平滑筋細胞で発現し、動脈硬化に関与することが知られている。そこで昨年度に引き続き血管平滑筋細胞においてNOによるHB-EGF誘導のメカニズムについて検討を加えるとともに膜結合型HB-EGFのアポトーシス抑制作用を明らかにした。 NOによるHB-EGFの発現誘導経路について検討をしたところ、HB-EGFの発現誘導はc-Jun N-terminalキナーゼ1(JNK1)のdominant-negative mutantで阻害された。さらにNOによるJNKの活性化とHB-EGFの発現誘導がカタラーゼ、N-アセチルシステイン(NAC)で阻害された。昨年度の結果と併せ、NOによる過酸化物の蓄積がJNKを活性化しHB-EGFの発現を誘導することが示唆された。 NOによって誘導されるHB-EGFの役割を検討するために、SNAPとともにアンチセンスHB-EGFオリゴヌクレオチドをラット血管平滑筋細胞に添加したところ、DAPI(正式名称を記載)の核染色にて染色体凝縮(chromosome condensation)が認められた。また、よう化プロピジウム(propidium iodide)を用いたFACS解析ならびにDNAのアガロース電気泳動によってもアポトーシスが確認された。以上によりNOとアンチセンスHB-EGFオリゴヌクレオチドを同時に投与するとアポトーシスを含む細胞死をもたらすことが考えられた。以上より血管におけるNOによる酸化ストレスに対してHB-EGFが誘導され保護的に働き、抗動脈硬化作用をもたらしていることが示唆された。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Fukui S. et al.: "Post-ischemic transcriptional and translational responses of EC SOD in mouse brain and serum"Free Rad. Biol. Medicine. 32. 289-298 (2002)
[文献書誌] Kizaki T. et al.: "Stress-and aging-associated modulation of macrophage functions"Environmental Health and Preventive Medicine. 6. 218-228 (2002)
[文献書誌] Suzuki K, et al.: "Enzyme-linked immunosorbent assay for human and rat Mn-superoxide dismutase"Methods Enzymol.. 349. 129-141 (2002)
[文献書誌] Eguchi H, et al.: "Oxidative Damage Due to Copper Ion and Hydrogen Peroxide Induces GlcNAc-Specific Cleavage of an Asn-Linked Oligosaccharide"J. Biochem.. 131. 477-484 (2002)
[文献書誌] Park YS, et al.: "Induction of thioredoxin reductase gene expression by peroxynitrite in human umbilical vein endothelial cells"Biol. Chem.. 383. 683-691 (2002)
[文献書誌] Yamamoto K. et al.: "Myocardial stiffness is determined by ventricular fibrosis, but not by compensatory or excessive hypertrophy in hypertensive heart"Cardiovasc. Res.. 55. 76-82 (2002)

2002 年度 実績報告書

活性酸素種・NOによる増殖因子誘導とプロセシングを介した動脈硬化発症機序の解明

研究代表者

鈴木 敬一郎 兵庫医科大学, 医学部, 教授 (70221322)

研究成果

[文献書誌] Fukui S. et al.: "Post-ischemic transcriptional and translational responses of EC SOD in mouse brain and serum"Free Rad. Biol. Medicine. 32. 289-298 (2002)

[文献書誌] Kizaki T. et al.: "Stress-and aging-associated modulation of macrophage functions"Environmental Health and Preventive Medicine. 6. 218-228 (2002)

[文献書誌] Suzuki K, et al.: "Enzyme-linked immunosorbent assay for human and rat Mn-superoxide dismutase"Methods Enzymol.. 349. 129-141 (2002)

[文献書誌] Eguchi H, et al.: "Oxidative Damage Due to Copper Ion and Hydrogen Peroxide Induces GlcNAc-Specific Cleavage of an Asn-Linked Oligosaccharide"J. Biochem.. 131. 477-484 (2002)

[文献書誌] Park YS, et al.: "Induction of thioredoxin reductase gene expression by peroxynitrite in human umbilical vein endothelial cells"Biol. Chem.. 383. 683-691 (2002)

[文献書誌] Yamamoto K. et al.: "Myocardial stiffness is determined by ventricular fibrosis, but not by compensatory or excessive hypertrophy in hypertensive heart"Cardiovasc. Res.. 55. 76-82 (2002)

2002 年度実績報告書

鈴木敬一郎兵庫医科大学, 医学部, 教授 (70221322)