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肝がん治療法への応用を目指し、肝がん細胞におけるTGF-β刺激によるアポトーシス誘導機構の解析を進めた。肝がん細胞のアポトーシス誘導性亜株を樹立し、更にアポトーシス特異的cDNAアレイの解析から、TGF-β刺激によりTNFファミリーの発現が誘導される結果を得ていた。この知見に基づきTGF-β刺激からアポトーシス誘導に至る過程を詳細に検討した。TGF-β刺激後、FACS解析・遺伝子発現解析・カスペース活性化解析を経時的に施行した。その結果、TGF-βによるアポトーシス誘導は一時的G1/G2停止の後に起こり、主として、TNFファミリー遺伝子群の発現誘導、TNFファミリー受容体活性化、それによるカスペース-8の切断活性化という経路で引き起こされていることが示唆された。更にこの知見に基づき、TNFファミリーに対する中和抗体及びカスペース-8阻害剤によるアポトーシス抑制作用を検討した。その結果、中和抗体及びカスペース-8阻害剤処理はともに約50%程度の部分的抑制作用を示した。又、NF-κBレポーター解析により、TGF-β刺激によりNF-κBの活性化が見られた。以上の解析から、TGF-β刺激によりTNFファミリー活性化からカスペース-8の活性化へ至るアポトーシス誘導経路が確認された。又、TGF-β刺激によりアポトーシス抑制性のNF-κB活性化も同時に起こることが示された。今後、高密度cDNAアレイを用いて、アポトーシス誘導の刺激伝達ネットワークの全容解明を目指したい。又、NF-κBの活性化とアポトーシス抵抗性との関連も検討したい。
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