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1.Epstein-Barr virus(EBV)感染と炎症の共同作用によるリンパ腫発生モデルとして、EBVにより自律増殖能を獲得したBリンパ球系細胞株(Lymphoblastoid cell line ; LCL)を、キサンチンとキサンチンオキシダーゼによる活性酸素発生系で繰り返し処理したところ、軟寒天でのコロニー形成能の獲得がみられ、クローンの分離、樹立が可能であった。
2.得られたコロニー形成クローン3クローンと親株のLCLを対象として、細胞周期及びそのチェックポイント(p53およびpRB経路)に関与する遺伝子(2者に加え、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ、サイクリン依存性キナーゼインヒビター; CDKNs)の発現変動、及び変異の有無を検討した。
(1)蛋白レベルでの発現変動をウエスタンブロットで検討したところ、一部クローンでサイクリンA及びCDK2の発現変化を認めたが、コロニー形成クローンに共通する発現変動の同定には至らなかった。
(2)点突然変異が多く報告されているp53については、変異のホットスポット領域を含むエクソン5-8について、direct sequencingにより変異の有無を検索したが、特に変異の誘導の検出には至らなかった。
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