| 研究概要 |
1.Epstein-Barr virus(EBV)により自律増殖能を獲得したBリンパ球系細胞株(Lymphoblastoid cell line ; LCL)を、キサンチンとキサンチンオキシダーゼによる活性酸素発生系で繰り返し処理して得られたコロニー形成クローンについて、p53,pRB, p15,p16,p21のがん抑制遺伝子に関し、遺伝子近傍のマイクロサテライトマーカーを用いたLOH解析でheterozygous deletionの可能性を、またPCRによりhomozygous deletionの有無を検討したが、特定のdeletionの確認には至らなかった。
2.既に樹立してあった膿胸リンパ腫由来細胞株2株について、以下の遺伝子変化及び発現レベルを検討した。
(1)上記1.で検討したがん抑制遺伝子について、そのheterozygousあるいはhomozygous deletionの有無を検討したが、特定のdeletionの確認には至らなかった。
(2)点突然変異が多く報告されているp53については、変異のホットスポット領域を含むエクソン5-8について、direct sequencingにより変異の有無を検索したが、特に変異の検出には至らなかった。
(3)細胞周期及びそのチェックポイント(p53およびpRB経路)に関与する遺伝子(p53およびpRBの2者に加え、サイクリン、サイクリン依存性キナーゼ、サイクリン依存性キナーゼインヒビター)産物(蛋白)の発現レベルをウエスタンブロットで検討したが、2株に共通した発現パターンは認められなかった。
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