2001 年度実績報告書

毒素原性大腸菌のLTの構造と粘膜アジュバントおよび免疫賦活抑制作用の解析

研究課題

研究課題/領域番号	13670285
研究機関	藤田保健衛生大学
研究代表者	辻孝雄藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60171998)
キーワード	粘膜アジュバント / 毒素原性大腸菌 / 易熱性下痢毒素(LT) / 水痘ウイルス / γδT細胞 / B1細胞
研究概要	LTは種々の抗原と同時に経鼻投与すると粘膜アジュバント活性を示す。我々は既に毒性が低く、水痘ウイルス(VZV)、インフルエンザワクチンに優れた粘膜アジュバント効果を持つ変異毒素を報告してきた。一方LTをマウスに筋肉内投与すると全身の免疫組織、腹腔内投与するとB1細胞に細胞死が起こり、腹腔内γδT細胞が誘導されることを証明している。これは免疫組織の違いにより毒素は異なる作用を持つことを示す。そこで、本研究では各作用と毒素構造の関連を解析し、粘膜アジュバント活性への各細胞の関与の解明と有効アジュバントの開発を目的としている。今回の研究費公布期間内には以下の実験を行い各項目を明らかにする。(a)アジュバント活性の高い変異毒素の作成と実用化への基礎実験を行う。既に毒素活性部位以外の構造がアジュバント活性に関与することを証明している。同部位の変異毒素による解析と、VZV、インフルエンザワクチンで実用化実験を試みているH44A等、無毒なアジュバントを作成する。(b)マウス腹腔内γδT細胞がLTの腹腔内投与で増加した。IL-10産生性、γ1,3,4,6型、δ1,4-6型のγδT細胞が誘導され、GM1受容体に依存性と非依存性が存在していた。今後変異毒素により構造との関連性を解析し、粘膜アジュバント活性へのγδT細胞の関与を明らかにする。(c)LTはマウス腹腔内投与でB1細胞の細胞死を起こす。変異毒素により受容体依存性などB1細胞死とLTの構造との関連性を明らかにし、粘膜アジュバント活性へのB1細胞の関与を明らかにする。(d)毒素の筋肉内注射は、胸腺、脾臓、骨髄などに細胞死を起こす。これはTNFα抗体で阻害される。抗体で阻害される。現在変異毒素により粘膜アジュバント活性との関連性を検索している。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Sasaki K, Tsuji T, et al.: "Adjuvant action of Escherichia coli enterotoxin for delayed-type hypersensitivity to Oka vaccine virus on pernasal co-administration in mice"Vaccine. 22. 931-936 (2001)
[文献書誌] Hagiwar Y, Tsuji T, et al.: "Effectiveness and safety of mutant Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LT H44A) as an adjuvant for nasal influenza vaccine"Vaccine. 19. 2071-2079 (2001)
[文献書誌] Kamiya N, Tsuji T., et al.: "Long-term persistence of cellular immunity to Oka vaccine virus induced by pernasal co-administration with Escherichia coli enterotoxin in mice"Vaccine. 30. 3131-3136 (2001)
[文献書誌] Jarnicki AG, Tsuji T, et al.: "Inhibition of mucosal and systemic T(h)2-type immune responses by intranasal peptides containing a dominant T cell epitope of the allergen Derp1"Int Immunol. 13. 1221-1223 (2001)
[文献書誌] Honma Y, C, Tsuji T, et al.: "Enhanced anti-Shigella activity of erythromycin supplemented with sulfadiazine"FEMS Immunol Med Microbiol.. 32. 43-46 (2001)
[文献書誌] 辻孝雄: "蛋白質核酸酵素"コレラ毒素と毒素原性大腸菌の易熱性下痢毒素の構造と作用機序:他の毒素との構造と機能の類似性.「生物間の攻撃と防御の蛋白質」. 470-477 (2001)

2001 年度 実績報告書

毒素原性大腸菌のLTの構造と粘膜アジュバントおよび免疫賦活抑制作用の解析

研究代表者

辻 孝雄 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60171998)

研究成果

[文献書誌] Sasaki K, Tsuji T, et al.: "Adjuvant action of Escherichia coli enterotoxin for delayed-type hypersensitivity to Oka vaccine virus on pernasal co-administration in mice"Vaccine. 22. 931-936 (2001)

[文献書誌] Hagiwar Y, Tsuji T, et al.: "Effectiveness and safety of mutant Escherichia coli heat-labile enterotoxin (LT H44A) as an adjuvant for nasal influenza vaccine"Vaccine. 19. 2071-2079 (2001)

[文献書誌] Kamiya N, Tsuji T., et al.: "Long-term persistence of cellular immunity to Oka vaccine virus induced by pernasal co-administration with Escherichia coli enterotoxin in mice"Vaccine. 30. 3131-3136 (2001)

[文献書誌] Jarnicki AG, Tsuji T, et al.: "Inhibition of mucosal and systemic T(h)2-type immune responses by intranasal peptides containing a dominant T cell epitope of the allergen Derp1"Int Immunol. 13. 1221-1223 (2001)

[文献書誌] Honma Y, C, Tsuji T, et al.: "Enhanced anti-Shigella activity of erythromycin supplemented with sulfadiazine"FEMS Immunol Med Microbiol.. 32. 43-46 (2001)

[文献書誌] 辻 孝雄: "蛋白質核酸酵素"コレラ毒素と毒素原性大腸菌の易熱性下痢毒素の構造と作用機序:他の毒素との構造と機能の類似性.「生物間の攻撃と防御の蛋白質」. 470-477 (2001)

2001 年度実績報告書

辻孝雄藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (60171998)

[文献書誌] 辻孝雄: "蛋白質核酸酵素"コレラ毒素と毒素原性大腸菌の易熱性下痢毒素の構造と作用機序:他の毒素との構造と機能の類似性.「生物間の攻撃と防御の蛋白質」. 470-477 (2001)