弱毒化サルモネラを担体とした経口ワクチンによる細胞性免疫の誘導

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670288
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 松井 英則 北里大学, 北里生命科学研究所, 講師 (30219373)
• 研究分担者: 江口 正浩 北里大学, 北里生命科学研究所, 助手 (00312215) ; 中村 正彦 北里研究所, 基礎研究所, 研究員 (30155858) ; 一色 恭徳 城西大学, 薬学部, 助手 (60312211)
• キーワード: サルモネラ / ワクチンベクター / 細胞性免疫

研究概要

本研究は次の2段階に分かれる。(1)抗原遺伝子の高発現系を遺伝子操作により弱毒化したサルモネラに導入しワクチン株を作製する。(2)作製したワクチン株をマウスへ経口投与することにより、効率良く細胞性免疫を誘導させる。サルモネラベクターは腸管粘膜を刺激し、菌より産生した抗原蛋白質のエピトープがT細胞に提示され、免疫系が誘導される。本年度はSalmonella typhimuriumのストレス応答プロテアーゼの病原性に及ぼす役割を解明し、その欠損株がワクチンベクターとして利用できることを明らかにした。すなわち、S.typhimuriumのストレス応答プロテアーゼは種々の病原遺伝子の発現を調節しており、clpPX及びlon欠損変異株は経口感染マウスにごくわずかな量持続的に感染する。しかし病原性は極めて低くマウスの体重増加などに全く影響を及ぼさない。in vitroの解析からclpPXを欠損した株はhyperflagellation(多鞭毛菌体)となり、lon欠損株はfilamentous cell(糸状菌体)を形成し通常の菌体の50倍にも膨張する。両変異株とも腸管上皮細胞への侵入性は野生株より増加するが食細胞に対する抵抗性が低下しているため生体内で増殖できない。我々が見出したclpPX及びlon欠損変異株はこれまで報告されているサルモネラベクター株に比較して単に弱毒化しているだけでなく、菌体の構造、分泌蛋白質、上皮細胞への侵入性等に既存の弱毒株には見られない非常にユニークな特徴を持っている。

研究成果

• [文献書誌] H.Matsui, M.Eguchi, Y.Kikuchi.: "Effect of constitutively expressed phoP gene on the localization of Salmonella typhimurium within Mac-1 positive phagocytes"Microbiology and Immunology. 45(1). 79-83 (2001)
• [文献書誌] 中村正彦, 松井英則, 秋葉保忠, 石井裕正: "Hp感染Mongolian gerbil胃粘膜内のlansoprazole結合部位の検討-lansoprazole1ヶ月連続投与後の変化-"胃分泌研究会誌. 33. 5-8 (2001)
• [文献書誌] Yamamoto, H.Sashinami, A.Takaya Tomoyasu, Hi.Matsui, Y.Kikuchi.et al.: "Disruption of the genes for ClpXP protease in Salmonella enterica serovar Typhimurium results in a persistent infection in mouse and the development requires endogenous interferon-gamma and tumour neerosis factor alpha"Infection and Immunity. 69(5). 3164-3174 (2001)
• [文献書誌] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Confocal laser microscopic observsation of H.pylori adhesion to gastrointestinal culture cells"Progress in Medicine. 21(3). 587-590 (2001)
• [文献書誌] H.Matsui, C.M.Bacot, et al.: "The virutence plasmid-bome spvB and spvC genes can replace the 90-kilobase plasmid in conferring virulence to Salmonella enterica serovar Typhimurium in subcutaneously inoculated mice"Journal of Bacteriology. 183(15). 4652-4658 (2001)
• [文献書誌] M.Nakamura, T.Akiba, H.Matsui, et al.: "Angiogenesis during healing of acetic acid-induced ulcer : significance of basic fibroblast growth factor"Ulcer Research. 28(1). 5-7 (2001)
• [文献書誌] M.Nakamura, H.Matsui, et al.: "Alteration of Parietal Cell in Hp-infected Mongolian Gerbil Fundic Mucosa-Relation to Binding Site of H3-cimetidine-"Terapeutic Research. 22(Suppl.1). S59-S63 (2001)
• [文献書誌] M.Nakamura, S.Takahashi, H.Matsui, K.Nishikawa, Y.akiba, H.Ishii.: "Persistent increase in myofibroblasts in Helicobacter heilmannii-infected but not in Helicobacter pylori-infected Mongolian gerbil-colocalization of COXII and bFGF immunoreactivity"Alimentary Pharmacology and Therapeutics. 16(3)(in press). (2002)
• [文献書誌] T.Tomoyasu, T.Ohkishi, Y.Ukyo, A.Tokumitsu, A.Takaya, M.Suzuki, K.Sekiya, H.Matsui, et al.: "The CIpPX ATP-dependent protease regulates flagellum synthesis in Salmonella enterica serovar Typhimurium"Journal of Bacteriology. 184(3). 645-653 (2002)
• [文献書誌] A.Kaneko, M.Mita, K.Sekiya, H.Matsui, Kazuyoshi, et al.: "Association of a regulatory gene, slyA with a mouse virulence of Salmonella serovar Choleraesuis"Microbiology and Immunology. 46(2). 109-113 (2002)
• [文献書誌] 秋葉保忠, 中村正彦, 織田正也, 石井裕正: "酸による十二指腸粘膜上皮細胞傷害におけるion transportの役割"Ulcer Research. 28(2). 139-143 (2001)
• [文献書誌] 143中村正彦, 秋葉保忠, 谷中昭典, 石井裕正: "食道下部粘液腺の構造と機能-PPIの新たな作用部位として-"消化器科. 33(6). 498-500 (2001)
• [文献書誌] 中村正彦, 土本寛二, 石井裕正: "胃粘膜修復機転からみた線維芽細胞-筋線維芽細胞系の意義-"消化器科. 32(4). 355-359 (2001)
• [文献書誌] 中村正彦, 土本寛二, 秋葉保忠, 石井裕正: "胃粘膜における自律神経の意義-Helicobacter pylori感染と自律神経の関連-"自律神経. 38(2). 144-147 (2001)
• [文献書誌] M.Nakamura, K.Tsuchimoto, H.Ishii.: "Alcohol and the pancreas"Alcoholism Clinical and Experimental Research. 25. 244S-250S (2001)
• [文献書誌] 中村正彦: "胃粘膜傷害と自律神経、血管新生因子、成長因子"日本医師会雑誌. 126. M28-M30 (2001)
• [文献書誌] 中村正彦, 土本寛二, 石井裕正: "H.pylori時代の消化性潰瘍学 -H.pylori発見20周年を記念して-"日本臨床. 60(Suppl.2). 137-142 (2002)
• [文献書誌] 中村正彦, 土本寛二: "胃酸分泌と壁細胞-H2ブロッカーとPPIの対比-"消化器診療. 55. 12-13 (2002)
• [文献書誌] Kawahara K, Lindner B, Isshiki Y, lakob K, Knirel YA, Zhringer U: "Structural analysis of a new glycosphingolipid from the lipopolysaccharide-lacking bacterium Sphingomonas adhaesiva"Carbohydrate Research. 333(1). 87-89 (2001)
• [文献書誌] Isshiki Y, Matsuura M, Deisirilert S, Ezaki T.: "Separation of 6-deoxy-heptan [ correction of 6-deoxy-heptane ] from a smooth-type lipopolysaccharide preparation of Burkholderia"FEMS Microbiology Letter. 199(1). 21-25 (2001)
• [文献書誌] Shimomura H, Matsuura M, Saito S, Hirai Y, Isshiki Y.: "Lipopolysaccharide of Burkholderia cepacia and its unique character to stimulate murine macrophages with relative lack of interleukin-1beta-inducing ability"Infection and Immunnity. 69(6). 3663-3669 (2001)
• [文献書誌] 中村正彦, 松井英則, 土本寛二, 秋葉保忠, 織田正也, 石井裕正: "消化管ホルモン(XIX)"医学図書出版株式会社. (2001)