| 研究課題/領域番号 |
13670412
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| 研究機関 | 大阪府立公衆衛生研究所 |
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研究代表者 |
小西 良昌 大阪府立公衆衛生研究所, 食品衛生部, 主任研究員 (40211239)
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| 研究分担者 |
阿久津 和彦 大阪府立公衆衛生研究所, 食品衛生部, 研究員 (00311481)
高取 聡 大阪府立公衆衛生研究所, 食品衛生部, 研究員 (90311480)
北川 幹也 大阪府立公衆衛生研究所, 食品衛生部, 研究員 (90270769)
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| キーワード | PCBアイソマー分析 / 水酸化PCB / 母乳 / 内分泌かく乱作用 / エストロジェン様作用 / 経年変化 / 酵母Two-Hybrid法 |
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| 研究概要 |
高分解能GC/MSを用いて、ポリ塩素化ビフェニール(PCB)川のアイソマー分析を行い、母乳中濃度の経年変化(1973年から2000年)を測定した。測定に用いた乳脂肪は、1973年以降冷凍保存していたもので、年齢25〜29才初産婦のみを対象とし、母乳採取年度別に等量混合(各年度19〜32人)し、四、五、六、七塩化のPCBアイソマー分析を行った。その結果、母乳中のPCB濃度は、70年代をピークに急激に減少していたが、その検出パターンは年々変化しており、塩素数の少ない四、五塩化PCBが大きく減少しているのに対し、六、七塩化PCBの減少度は少ない。また、塩素の結合位置により、体内への残留度の差が見られた。これらの詳細については、摂取源および代謝の両面から現在考察中である。
水酸化PCBの高感度分析を目的とした誘導体化について検討を行った。PFBBrによる誘導体化は水酸基に隣接した塩素による立体障害のため、水酸基の誘導体化が安定しないことがわかった。そこで、誘導体化の方法をメチル化に限定した。メチル化は、TMAHによる誘導体化を用いた。本法はGCの注入口内で高温(300℃)で誘導体化するため、実験者に比較的安全な上、操作として非常に簡便である。抽出した脂肪をゲル浸透クロマトグラフィー(GPC)に負荷、目的フラクションを分取し、脂肪等を除去したが、溶出時間に分子サイズによる影響が大きいことが明かになった。精製法としては、マルチモードの固相カートリッジを用いた結果、メタノールによる溶出により良好な結果が得られた。
生体試料から検出される異性体と、主要な摂取源である魚介類から検出される異性体と比較した結果、低塩素化PCB及び4位に塩素を持たない異性体が生体試料で低いことが分った。これらを比較的、代謝を受けやすい異性体と考え、S-9処理を施して代謝物のエストロジェン様作用を酵母Two-Hybrid法で評価している。代謝物のエストロジェン様作用は、塩素化が高度になるにつれて低下する傾向が認められた
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