転写因子NFIL-6(C/EBPβ)制御による慢性関節リウマチの治療

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670456
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 佐伯 行彦 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (40240840)
• キーワード: 慢性関節リウマチ / 転写因子 / NFIL-6 / COX

研究概要

転写因子NFIL-6を制御することが慢性関節リウマチ(RA)の治療につながるかどうかを検討するために,転写因子NFIL-6の結合部位を遺伝子の上流にもつ,IL-6,IL-8,PGE_2,COX2などのRAの病態形成に密接に関わっていると考えられている分子の発現がNFIL-6の阻害により抑制されるかどうか,RA患者由来の関節滑膜細胞を用いてin vitroで検討した.転写因子NFIL-6の阻害は,転写因子NFIL-6の結合部位と同じ塩基配列をもつ二重鎖20オリゴヌクレオチドをデコイとしてリポゾーム法(HVJ-リポゾーム)に、より滑膜細胞にトランスフェクションして行った.各分子のmRNAの発現は,GAPDHをインターナルコントロールとした半定量RT-PCR法を用いて検討した.デコイのコントロールとして,ミスマッチ20オリゴヌクレオチド,オリゴヌクレオチドの入っていない空ベクターを用いた.HVJ-リポゾームをベクターとして,デコイ,ミスマッチオリゴヌクレオチドを滑膜細胞に導入した.蛍光顕微鏡でGFPの発現を検討し,導入率(70〜80%)を確認後,IL-1β存在下で12時間培養後,mRNAを回収,RT-PCR法を用いて,各分子の発現を検討した.その結果,IL-6,IL-8,PGE_2の発現は,3群において有意な差を認めなかったが,COX2の発現は,デコイ導入滑膜細胞では,空ベクター,ミスマッチオリゴヌクレオチド導入細胞に比べて,約30%の低下を認めた.以上の結果から,滑膜細胞でのCOX2の発現は転写因子NFIL-6依存的であり,転写因子NFIL-6の阻害により,RAの滑膜細胞に抗炎症性作用が誘導されるごとが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Saeki Y, Ohshims S, Ishida T, Shima Y, Umeshita-Sasai M, Nishioka K, Yamaguchi N, Suemura S: "Remission of the renal involvement in a patient with primary Sjogren's syndrome (SS)after pulse high-dose corticosteroid infusion therapy"Clin Rheum. 20(3). 225-228 (2001)
• [文献書誌] Tanaka T, Katada Y, Higa S, Fujiwara H, Wang W, Saeki Y, Okuda Y, Suemura M, Kishimoto T: "Enhancement of T Helper(2)Response in the Absence of Interleukin(IL-)6;An Inhibition of IL-4-Mediated T Helper(2)Cell Differentiation by IL-6"Cytokine. 13(4). 193-201 (2001)
• [文献書誌] Segal NA, Toda Y, Huston J, Saeki Y, Shimizu M, Fuchs H, Shimaoka Y, Holoomb R, McLean MJ: "Two configurations of static magnetic fields for treating rheumatoid arthritis of the knee : a double-blind clinical trial"Arch Phys Med Rehabil. 82(10). 1453-1460 (2001)
• [文献書誌] Yamagichi T, Ohshima S, Kohmo S, Matsushita M, Tsukada T, Saeki Y: "Renal crisis due to intimal hyperplasia in a patient with mixed connective tissue disease(MCTD)with pulmonary hypertension"Internal Medicine. 40(12)(in press). 1250-1253 (2001)
• [文献書誌] Siganuma M, Okabe S, Kurusu M, Iida N, Ohshims S, Saeki Y, Kishimoto T, Fujiki H: "Discrete roles of cytokines, TNF-alpha, IL-1,Il-6 in tumor promotion and cell transformation"Int J Oncology. 20(1). 131-136 (2002)
• [文献書誌] Ohshima S, Kobayashi H, Yamaguchi N, Nishioka K, U-Sasai M, Mima T, Nomura S, Kon S, Inobe M, Ueda T, Saeki Y: "Expression of osteopontin(OPN)at sites of bone erosion in murine experimental arthritis model, collagen-induced arthritis(CIA):Possible involvement of OPN in bone destruction in arthritis"Arthritis Rheum. (in press).
• [文献書誌] Kobayashi H, Ohshima S, Nishioka K, Yamaguchi N, U-Sasai M, Ishii T, Mima T, Kishimoto T, Kawase I, Saeki Y: "Antigen induced arthritis(AIA) can be transferred by bone marrow transplantation : The evidence that IL-6 is essential for the induction of AIA"J Rheumatol. (in press).
• [文献書誌] Ohshima S, Ishii M, Asada H, Takekawa T, Yamagichi N, Kobayashi H, Ishii T, Mima T, Kawase I, Saeki Y: "A possible mechanism of NK cell-lineage granular lymphocyte proliferative disorder(NK-GLPD9 in a patient with chronic active Epstein-Barr virus infection(CAEBV)and severe hypersensitivity to mosquito bites(SHMB)"Internal Medicine. (in press).