2001 年度実績報告書

セリンプロテアーゼインヒビターによる免疫制御機構の解明と治療への応用:アポトーシスとサイトカインを操るSerpin PI-9の検討

研究課題

研究課題/領域番号	13670461
研究機関	長崎大学
研究代表者	江口勝美長崎大学, 医学部, 教授 (30128160)
研究分担者	川上純長崎大学, 医学部, 助手 (90325639)
キーワード	アポトーシス / NK細胞 / グランザイムB / セリンプロテアーゼインヒビター / PI-9 / 慢性関節リウマチ(RA) / マクロファージ様滑膜細胞 / IL-1β
研究概要	1)NK細胞のアポトーシスとSerpin PI-9制御機構の解明表面抗原(CD2)刺激で活性化されたNK細胞は、大変速いスピード(1〜2時間以内)でアポトーシスを生じるが、カスパーゼインヒビター(ZVAD)前処置にてNK細胞のアポトーシス誘導は抑制できず、カスパーゼ非依存性の機序が考えられた。NK細胞の顆粒内に存在するグランザイムBは、CD2刺激で1分以内に顆粒外へ漏出することを細胞免疫染色で証明した。また、グランザイムB/PI-9複合体が1分以内に出現することを免疫沈降法で証明した。IL-2添加12時間後から表面抗原刺激によるアポトーシスは増強し、同時にNK細胞内のグランザイムB蛋白量の増加とPI-9蛋白量の低下がみられた。活性化されたNK細胞では、NK細胞中の漏れ出たグランザイムBの蛋白量とPI-9分子の蛋白量とのバランスによってNK細胞のアポトーシス誘導は規定されている可能性が考えられた。 2)RAにおけるSerpin PI-9制御機構の解明人工関節置換術施行RA患者からコラゲナーゼ処理で採取した滑膜細胞を使用してIL-1β産生能を検討した。マクロファージ様滑膜細胞が多い1〜2継代目の培養滑膜細胞においてIL-1β産生がみられた。エストロゲンによってP1-9分子発現量が増加することが、細胞株で証明されているため、種々の濃度のエストロゲンを培養液に加え、24時間後に培養上清中のIL-1βを測定したところ、10^<-8>M以上の濃度のエストロゲン添加でIL-1β産生は抑制された。また同時に10^<-8>M以上の濃度のエストロゲンを添加された滑膜細胞のPI-9蛋白発現量は増強していた。このように、マクロファージ様滑膜細胞におけるIL-1β産生は、カスパーゼ-1のインヒビターであるPI-9分子の量に規定されている可能性が示唆された。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] K.Shibatomi, et al.: "A novel role for Interleukin-18 in human NK cell death : high serum levels and low NK cell number in systemic autoimmune diseases."Arthritis Rheum. 44(4). 884-892 (2001)
[文献書誌] K.Migita, et al.: "Regulation of rheumatoid synoviocyte proliferation by endogenous p53 induction."Clin Exp Immunol. 126(2). 334-338 (2001)
[文献書誌] K.Migita, et al.: "Nitric oxide protects cultured rheumatoid synvial cells from Fas-induced apoptosis by inhibiting caspase-3."Immunology. 103. 362-367 (2001)
[文献書誌] S.Yamasaki, et al.: "Importance of NF-κB in rheumatoid svnovial tissues: in situ NF-κB expression and in vitro study using cultured synovial cells."Ann.Rheum.Dis.. 60(7). 678-687 (2001)
[文献書誌] K.Migita, et al.: "Impaired degradation of serum amyloid A(SAA)protein by cytokine-stimulated monocytes."Clin Exp Immunol. 123(3). 408-411 (2001)
[文献書誌] Y.Hirai, et al.: "Effects of nitric oxide on matrix metalloproteinase-2 production by rheumatoid synovisl cells."Life Sciences. 68. 913-920 (2001)
[文献書誌] 井田弘明: "セルピンプロテアーゼインヒビター9(PI-9)"先端医学社. 736-737 (2001)

2001 年度 実績報告書

セリンプロテアーゼインヒビターによる免疫制御機構の解明と治療への応用:アポトーシスとサイトカインを操るSerpin PI-9の検討

研究代表者

江口 勝美 長崎大学, 医学部, 教授 (30128160)

研究成果

[文献書誌] K.Shibatomi, et al.: "A novel role for Interleukin-18 in human NK cell death : high serum levels and low NK cell number in systemic autoimmune diseases."Arthritis Rheum. 44(4). 884-892 (2001)

[文献書誌] K.Migita, et al.: "Regulation of rheumatoid synoviocyte proliferation by endogenous p53 induction."Clin Exp Immunol. 126(2). 334-338 (2001)

[文献書誌] K.Migita, et al.: "Nitric oxide protects cultured rheumatoid synvial cells from Fas-induced apoptosis by inhibiting caspase-3."Immunology. 103. 362-367 (2001)

[文献書誌] S.Yamasaki, et al.: "Importance of NF-κB in rheumatoid svnovial tissues: in situ NF-κB expression and in vitro study using cultured synovial cells."Ann.Rheum.Dis.. 60(7). 678-687 (2001)

[文献書誌] K.Migita, et al.: "Impaired degradation of serum amyloid A(SAA)protein by cytokine-stimulated monocytes."Clin Exp Immunol. 123(3). 408-411 (2001)

[文献書誌] Y.Hirai, et al.: "Effects of nitric oxide on matrix metalloproteinase-2 production by rheumatoid synovisl cells."Life Sciences. 68. 913-920 (2001)

[文献書誌] 井田弘明: "セルピンプロテアーゼインヒビター9(PI-9)"先端医学社. 736-737 (2001)

2001 年度実績報告書

江口勝美長崎大学, 医学部, 教授 (30128160)