2001 年度実績報告書

ヘリコバクター・ピロリのウレアーゼ活性を抑制する抗体の認識エピトープの同定

研究課題

研究課題/領域番号	13670481
研究機関	日本医科大学
研究代表者	高橋秀実日本医科大学, 医学部, 教授 (40221361)
キーワード	Helicobacter pylori / urease / 中和抗体 / Hybridoma / エピトープ / 合成ペプチド
研究概要	これまで報告者らは、Helicobacter pylori(以下Hpと略す)に感染した様々な胃十二指腸病変患者血清において、HPが胃粘膜に結合し定着するための鍵を握る菌体表面に位置する酵素であるurease、ことにそのlarge subunitであるB鎖が血清抗体の主たる認識抗原であることを見出す(日消誌91:2202,1994)とともに、胃炎の表層性変化にはureaseに対するlgA抗体の上昇が、また萎縮性変化にはIgG抗体の上昇が関連するすることを発見した(Gut43:168,1998)。一方、このHp-ureaseをBALB/cマウスに経口投与することによってHelicobacter felis感染を予防できたことが報告されている(Gastroenterol 107:1002,1994;Infect,Immu,63:1246,1995)。以上のことから、Hp-ureaseに対する抗体には病状進行を促進するものと、感染を予防するものとがあるとの立場から、本研究では感染予防に関与する抗体の認識部位の同定を試みた。本年度は、まず精製Hp-urease抗原をBALB/cマウスに投与し、その免疫脾臓細胞から取り出したB細胞をミエローマ細胞とhybridすることによって、Hp-urease特異的なhybridomaを約100株作成し、その中よりHp-ureaseの酵素活性(尿素分解能)を抑制するもの探索した結果、強い酵素活性抑制能を有する抗体産生株(L2)を見いだした。この際、Hp-ureaseを免疫した血清中には全くこの抑制能が認められないことを確認した。またこのL2抗体がHp-ureaseのlarge subunit B鎖を認識することを見いだした。そこで、B鎖全領域をカバーする20アミノ酸程度から成るoverlapしたペプチド群を合成し、抗体の認識エピトープ同定を試みたところ、33番目に相当するUB-33がエピトープペプチドを含むことを見いだした(Infect.Immu.69:6597,2001)。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Takahashi, M., Nakagawa, Y., Berzofsky, J.A., Takahashi, H.: "Counter-regulation of cytolytic activity and cytokine production in human immunodeficiency virus (HIV)-1-specific murine CD8+ cytotoxic T lymphocytes by free antigenic peptide"Int. Immunol.. 13・1. 43-51 (2001)
[文献書誌] Nakajima, Y., Takahashi, M., Norose, Y., Ogawa, R., Takahashi, H.: "Induction of apoptosis in mice thymocytes by tetracaine"Biomedical Res.. 21・5. 297-303 (2001)
[文献書誌] Machida, K., Tsukiyama-Kohara, K., Seike, E., Tone, S., Shibasaki, F., Shimizu, M., Takahashi, H. et al.: "Inhibiton of cytochrome C release in Fas-mediated signaling pathway by hepatitis C viral proteins in transgenic mice liver"J. Biol. Chem.. 276・15. 12140-12146 (2001)
[文献書誌] Watari, E., Shinya, E., Kurane, S., Takahashi, H.: "Effect of cyclosporin A on cell fusion in monkey kidney cell line persistently infected with measles virus"Intervirol.. 44・4. 209-211 (2001)
[文献書誌] Hirota, K., Nagata, K., Norose, Y., Futagami, S., Nakagawa, Y., Senpuku, H., Kobayashi, M., Takahashi, H.: "Identification of an antigenic epitope in Helicobacter pylori urease that induces neutralizing antibody production"Infect. Immu.. 69・11. 6597-6603 (2001)
[文献書誌] Hamada, H., Hiroi, T., Nishiyama, Y., Takahashi, H. et al.: "Identification of multiple isolated lymphoid follicles on the antimesenteric wall of the mouse small intestine"J. Immunol.. 168・1. 57-64 (2002)

2001 年度 実績報告書

ヘリコバクター・ピロリのウレアーゼ活性を抑制する抗体の認識エピトープの同定

研究代表者

高橋 秀実 日本医科大学, 医学部, 教授 (40221361)

研究成果

[文献書誌] Takahashi, M., Nakagawa, Y., Berzofsky, J.A., Takahashi, H.: "Counter-regulation of cytolytic activity and cytokine production in human immunodeficiency virus (HIV)-1-specific murine CD8+ cytotoxic T lymphocytes by free antigenic peptide"Int. Immunol.. 13・1. 43-51 (2001)

[文献書誌] Nakajima, Y., Takahashi, M., Norose, Y., Ogawa, R., Takahashi, H.: "Induction of apoptosis in mice thymocytes by tetracaine"Biomedical Res.. 21・5. 297-303 (2001)

[文献書誌] Machida, K., Tsukiyama-Kohara, K., Seike, E., Tone, S., Shibasaki, F., Shimizu, M., Takahashi, H. et al.: "Inhibiton of cytochrome C release in Fas-mediated signaling pathway by hepatitis C viral proteins in transgenic mice liver"J. Biol. Chem.. 276・15. 12140-12146 (2001)

[文献書誌] Watari, E., Shinya, E., Kurane, S., Takahashi, H.: "Effect of cyclosporin A on cell fusion in monkey kidney cell line persistently infected with measles virus"Intervirol.. 44・4. 209-211 (2001)

[文献書誌] Hirota, K., Nagata, K., Norose, Y., Futagami, S., Nakagawa, Y., Senpuku, H., Kobayashi, M., Takahashi, H.: "Identification of an antigenic epitope in Helicobacter pylori urease that induces neutralizing antibody production"Infect. Immu.. 69・11. 6597-6603 (2001)

[文献書誌] Hamada, H., Hiroi, T., Nishiyama, Y., Takahashi, H. et al.: "Identification of multiple isolated lymphoid follicles on the antimesenteric wall of the mouse small intestine"J. Immunol.. 168・1. 57-64 (2002)

2001 年度実績報告書

高橋秀実日本医科大学, 医学部, 教授 (40221361)