プロテアーゼ阻害剤を用いた肝線維症/肝硬変・肝再生不全の改善

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670579
• 研究機関: 独立行政法人理化学研究所
• 研究代表者: 小嶋 聡一 独立行政法人理化学研究所, 分子細胞病態学研究ユニット, 研究ユニットリーダー (10202061)
• 研究分担者: 奥野 正隆 岐阜大学, 医学部第一内科, 助教授 (10204140) ; 鈴木 康弘 独立行政法人理化学研究所, 分子細胞病態学研究ユニット, 協力研究員 (60332277)
• キーワード: 肝線維化・肝硬変 / 肝再生不全 / TGF-β活性化 / プラスミン / 血漿カリクレイン / プロテアーゼ阻害剤 / 肝星細胞 / 切断面認識抗体

研究概要

1・サイトキサゾンによるプロテアーゼ阻害剤の肝線維化/肝硬変・肝再生不全改善作用の増強:TGF-β活性化反応抑制能を有するプロテアーゼ阻害剤FOY305と相乗的にin vitro培養肝星細胞の活性化を抑制することを見い出したサイトキサゾンの作用機序を培養細胞を用いて解析したところ、サイトキサゾンはTGF-βのシグナル伝達経路を阻害することでTGF-β活性化反応を抑制するプロテアーゼ阻害剤と相乗的にTGF-β依存の肝星細胞活性化を抑制することがわかった。
2・断片化LAP抗体:プロテアーゼによって断片化された潜在型TGF-βを特異的に検出するプロテアーゼ断片化TGF-β抗体(断片化LAP抗体)を作製した。これらの抗体によって劇症肝炎の患者肝臓が染色されることを見い出し、世界で始めてヒトの病態形成過程においてプロテアーゼによるTGF-β活性化反応が起きていることを証明し、ヒトでもプロテアーゼインヒビターが肝疾患を予防できる可能性を示唆した。
3・TGF-β活性化反応の特異性:TGF-βにはβ1からβ3までの3つのアイソフォームが存在するが、切断サイトの決定によって活性化機構はアイソフォーム特異的であることが判明した。また、ヒトの肝線維化/肝硬変、肝再生不全肝の病態形成過程においてはプラスミンや血漿カリクレインなどのセリンプロテアーゼが主にTGF-β活性化反応に働いていることを示唆する成績を得た。
4・プロテアーゼ阻害剤の効能特異性:皮膚線維化の際に表皮角化細胞に誘導されるTGF-β1の活性化反応には主にセリンプロテアーゼが働いているが、一部マトリックスメタロプロテアーゼも関与していることを見い出した。今後、肺を始め、腎臓、子宮など他の臓器の線維化について、順次検討していく予定である。

研究成果

• [文献書誌] Suzuki, Y. et al.: "Retinoic acid controls blood vessel formation by modulating endothelial and mural cell interaction via transcriptional regulation of angiopoietin-2 in vascular progenitor cells."Blood. (In press). (2004)
• [文献書誌] Takano, Y. et al.: "RNF8 interacts with retinoid X receptor α and enhances its transcription-stimulating activity."J.Biol.Chem. (In press). (2004)
• [文献書誌] Kojima, S. et al.: "Acyclic retinoid in the chemoprevention of hepatocellular carcionoma."Int.J.Oncol. (In press). (2004)
• [文献書誌] 近藤和嘉子他: "TGF-β活性化機構とその制御"日本血栓止血学会誌. 14(3). 210-219 (2003)
• [文献書誌] Matsushima-Nishiwaki, R, et al.: "Molecular mechanism for growth suppression of human hepatocellular carcinoma cells by acyclic retinoid."Carcinogenesis. 24(8). 1353-1359 (2003)
• [文献書誌] Okuno, M et al.: "Retinoids in Cancer Chemoprevention"Current Cancer Drug Target.. 2(In press). (2004)