腫瘍特異的遺伝子発現を利用した難治性消化器がんに対する自殺遺伝子治療

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670580
• 研究機関: 千葉県がんセンター
• 研究代表者: 川村 希代子 千葉県がんセンター, 病理研究部, 上席研究員 (80260248)
• 研究分担者: 税所 宏光 千葉大学, 大学院・医学研究院・腫瘍内科学, 教授 (10092058) ; 田川 雅敏 千葉県がんセンター, 病理研究部, 部長 (20171572)
• キーワード: 遺伝子治療 / 腫瘍プロモーター / HSV-TK / レポーターアッセイ / c-erbB-2 / ミッドカイン

研究概要

腫瘍特異的プロモーターとして、多くの腫瘍で高い発現をみるが、正常組織での発現がきわめて低いミッドカイン遺伝子の転写調節領域を、レポーターアッセイを用いて解析した。とりわけ腫瘍特異性に関与する領域を明らかにするために、ゲノム遺伝子の5'上流よりさまざまな領域を欠く、欠損変異体を作成し同様な方法で検討した。その結果、(1)5種類のヒト肝がん細胞においては、転写開始点より2335塩基対の領域を含むゲノム遺伝子に最も強い転写活性が存在していた。(2)3種類のヒト膵がん細胞では、転写開始点より609塩基対の領域に、最も強い転写活性が存在していた。(3)肝がん膵がん細胞とも、転写開始点より1041、335塩基対の領域で転写活性化能は保たれていたが、70塩基対では全く転写活性が検出されなかった。(4)肝がん細胞では2335塩基対、膵がんでは609塩基対の下流にHerpes simplex virus-thymidine kinase(HSV-TK)遺伝子を結合させたDNAを発現させると、親株に比較してプロドラックであるガンシクロビルに対する感受性が著しく亢進した。また、胃がん、食道がん等で強い発現が観察されるc-erbB-2遺伝子のプロモーター領域について、同様な欠損変異体を作成して、転写活性化能を検討した。その結果(1)検討した、いずれの腫瘍細胞においても、転写開始点より251塩基対の領域が、533、344、124塩基対の領域よりも強い転写活性化能を示した。(2)この251塩基対の下流にHSV-TK遺伝子を結合させたDNAを腫瘍に導入すると、親株に比較して、ガンシクロビルに対する感受性が亢進し、この抗腫瘍効果はインビボにおいても、同様に観察された。

研究成果

• [文献書誌] Kawamura K, et al.: "The error-prone DNA polymerase ζ catalytic subunit(Rev3)gene is ubiquitously expressed in normal and malignant human tissues"Int. J. Oncol.. 18. 97-103 (2001)
• [文献書誌] Kawamura K, et al.: "Bystander effect in uracil phosphoribosyltransferase/5-fluorouracil-mediated suicide gene therapy is correlated with thelevel of intercellular communication"Int. J. Oncol.. 18. 117-120 (2001)
• [文献書誌] O-Wang J, Kawamura K, et al.: "DNA polymerase κ implicated in spontaneous and DNA damage-induced mutagenesis, is overexpressed in lung cancer"Cancer Res.. 61. 5366-5369 (2001)
• [文献書誌] Miyauchi M, Tagawa M, et al.: "Expression of herpes simplex virus-thymidine kinase gene controlled by a promoter region of the midkine gene confers selective cytotoxicity to ganciclovir in human carcinoma cells"Int. J. Cancer. 91. 723-727 (2001)
• [文献書誌] Maeda T, Tagawa M, et al.: "A minimum c-erbB-2 promoter-mediated expression of herpes simplex virus thymidine kinase gene confers selective cytotoxicity of human breast cancer cells to ganciclovir"Cancer Gene Ther.. 8. 890-896 (2001)
• [文献書誌] Yoshida Y, Saisho H, et al.: "A promoter region of midkine gene can activate transcription of an exogenous suicide gene in human pancreatic cancer"Anticancer Res.. (in press).