結核免疫成立過程におけるII型肺胞上皮細胞の役割

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670601
• 研究機関: 島根医科大学
• 研究代表者: 佐藤 勝昌 島根医科大学, 医学部, 助手 (00142331)
• 研究分担者: 清水 利朗 島根医科大学, 医学部, 助手 (60284030) ; 冨岡 治明 島根医科大学, 医学部, 教授 (40034045)
• キーワード: 結核菌 / M.avium complex / II型肺胞上皮細胞 / リンパ球 / マクロファージ / A-549細胞 / PBMC / サイトカイン

研究概要

これまでの検討により、結核菌やM.avium complex(MAC)は生体内でII型肺胞上皮細胞内へ侵入すること、また結核菌やMAC感染A-549ヒトII型肺胞上皮細胞株は、マクロファージ(Mφ)の抗菌活性を増強させる液性因子を遊離し、この因子はRT-PCR法でTNF-αやGM-CSFである可能性が示唆されているが、この細胞はその他にもMCP-1やIL-8などのサイトカインやサーファクタント(SP-D)を産生しており、これらがT細胞に如何なる作用を及ぼすかについては不明である。本研究では、今までのMφを用いての検討をさらに進めるとともに、II型肺胞上皮細胞が結核菌やMAC感染宿主でのT細胞依存性免疫応答にどのような役割を演ずるのかについて明らかにすることを目的としている。
1.Top chamber内にMono Mac 6 Mφを、bottom chamber内にA-549細胞を加えたdouble chamber systemを用いた。培養液中にTNF-αあるいはGM-CSFに対する抗体を添加することによって、結核菌やMACに対するMφ抗菌活性の増強作用が抑制された。これは、Mφの抗菌活性を増強させる液性因子がTNF-αやGM-CSFであるという今までの成績を強く支持するものである。
2.結核菌感染あるいは非感染A-549細胞上にPBMCを添加してConAあるいはPPD刺激によるPBMCの増殖性応答について検討した。Con A刺激では、A-549細胞の数の増加に伴ってPBMCの増殖性応答の有意な抑制が認められたが、この抑制作用はA-549細胞の感染の有無とは無関係であった。他方、PPD刺激の場合もA-549細胞数に依存したPBMCの増殖性応答の有意な抑制が認められたが、この作用はCon A刺激時と異なって結核菌感染時の方が非感染時よりも強い傾向を認めた。これらのことは、II型肺胞上皮細胞が宿主免疫応答能を低下させるような何らかの作用を有している可能性を示唆している。

研究成果

• [文献書誌] 佐藤勝昌, 清水利朗, 冨岡治朗 他: "抗酸菌のマクロファージ(Mφ)と肺胞上皮細胞への感染性と細胞内増殖性:Mφ内順化菌を用いての検討"結核. 76. 53-57 (2001)
• [文献書誌] Tomioka H, Shimizu T, Sato K, et al.: "Expression profiles of low molecular mass heat shock proteins by Mycobacterium avium and Mycodacterium intracellulare"FEMS Microbiology Letters. 200. 131-136 (2001)
• [文献書誌] Tomioka H, Sato K, Shimizu T, et al.: "Intramacrophage passage of Mycobacterium tuberculosis and M.avium complex alters the drug susceptibility of the organisms as determineo by intracellular susceptibility testing using macrophages and type II alveolar epithelial cells"Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 46. 519-521 (2002)
• [文献書誌] Tomioka H, Sato K, Shimizu T, et al.: "Anti-Mycobacterium tuberculosis activities of new fluoroquinolones in combination with other antituberculous drugs"Journal of Infection. (in press). (2002)
• [文献書誌] Sato K, Tomioka T, Shimizu K, et al.: "Type II alveolar cells play roles in macrophage-mediated host innate resistance to pulmonary mycobacterial infections by producing proinflammatory cytokines"The Journal of Infectious Diseases. (in press). (2002)
• [文献書誌] 冨岡治朗: "結核(光山正雄 編)分担執筆"医薬ジャーナル社. 414 (2001)