進行動脈硬化症完全退縮を目指した一酸化窒素合成酵素及び関連酵素の複合遺伝子治療

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670704
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 林 登志雄 名古屋大学, 医学部・附属病院, 助手 (80303634)
• 研究分担者: 井口 昭久 名古屋大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20109763)
• キーワード: 一酸化窒素 / アデノウィルス / 動脈硬化症 / 国際情報交換 / アメリカ

研究概要

in vivoでの内皮型NO合成酵素(eNOS)と誘導型NO合成酵素(iNOS)の進行動脈硬化症への影響を詳細に検討した。βガラクトシダーゼ、eNOS,iNOSを発現するアデノウイルスベクターを作成した。腹部大動脈をバルーン擦過した雄性白色家兎を0.5%コレステロール含有食で12週間飼育した後、1群、未治療、2群、シャム感染のアデノベクター、3群βガラクトシダーゼアデノウイルスベクター、4群、eNOSアデノベクター、5群、iNOSアデノベクター、6群、eNOS+iNOSの各アデノベクター、7群10倍量のeNOSアデノベクターの各群にわけ、アデノベクターをデスパッチカテーテルで経皮的に腹部大動脈から投与した。投与7日目に屠殺し検討した。eNOSは血管壁全体に,iNOSは内膜下に良く染色された。血清脂質には変動はなかったが、動脈硬化病変は4、7群で同程度有意に退縮した。血管内皮依存性弛緩反応、血管壁cGMPも4、7群でのみ増加した。一方、peroxynitrite染色部位、マトリックスメたロプロテアーゼ、MMP-1染色部位は5、6群に多かった。以上より、eNOSのアデノウイルスベクター投与により進行動脈硬化病変の退縮は部分的に得られ、機序として血管壁からの脂質吸収が考えられた。投与ウイルス量に指摘量があり、iNOSはiNOS存在部位に発現し、抗動脈硬化作用は示さなかった。今後、効率的な遺伝子導入方法を探る一助となった。

研究成果

• [文献書誌] Watanabe H, Hayashi T et al.: "Myosin light chain kinase regulates endothelial calcium entry and endothelium-dependent vasodilatation"FASEB J.. 15. 282-284 (2001)
• [文献書誌] Kumagai Y, Hayashi T. et al.: "Inhibition of endothelial nitric oxide synthase and suppression of vasorelaxation by phnanthraquinone"Am J Physiol-Regul Integ Physiol. 281. R25-R30 (2001)
• [文献書誌] Kumar NT, Hayashi T et al.: "Stabilization of atherosclerosis by a HMG-CoA reductase inhibitor-Effects of increasing basal NO and superoxide"Am J Physiol-Heart. Circ. Physiol. 281. H75-H83 (2001)
• [文献書誌] Jayachandran M, Hayashi T et al.: "Temporal effects of 17β-estradiol on caveolin-1 mRNA and protein in bovine aortic endothelial cels"Am J Physiol-Heart. Circ. Physiol. 281. H1327-H1333 (2001)
• [文献書誌] Sumi D, Hayashi T et al.: "HMG-CoA reductase inhibitor possess a novel anti-atherosclerotic effect other than serum lipid lowering effects"Atherosclerosis. 155. 347-357 (2001)
• [文献書誌] Tsunekawa T, Hayashi T et al.: "Cerivastatin, a hydroxymethlglutaryl coenzyme A reductase inhibitor, improves endothelial function in elderly diabeteics"Circulation. 104. 376-379 (2001)