Fas受容体活性化によるアポトーシス誘導へのプロテアソーム系の制御に関する研究

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13670740
• 研究機関: 和歌山県立医科大学
• 研究代表者: 羽野 卓三 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教授 (90156381)
• 研究分担者: 今西 敏雄 和歌山県立医科大学, 医学部, 助手 (00285389)
• キーワード: アポトーシス / Fas-Fas ligand伝達系 / プロテアソーム / 酸化LDL / 血管内皮細胞 / 血管平滑筋細胞

研究概要

ヒト培養血管内皮細胞(HUVECs)および血管平滑筋細胞(hVSMCs)は共に、プロテアソーム活性の低下に伴い、細胞表面Fasの発現を増強し、同時にFas刺激に対する感受性を獲得することを平成13年度に明らかにした。平成14年度は、酸化LDLとプロテアソーム活性との関連をみた。プロテアソーム活性は合成蛍光基質(sLLVY-MCA)を用い、蛍光マルチプレートーリーダーにより半定量的に測定した。酸化LDLは細胞内のプロテアソーム活性を濃度依存性に低下させ,細胞表面のFasを増強させ、Fas誘導アポトーシスに対する感受性を高めた。酸化LDLは、HUVECsとhVSMCsの両者において酸化LDLに対する受容体の一つであるlectin-like oxidized low density lipoprotein-1 (LOX-1)の発現をmRNAのレベルで増強させることをRT-PCR法により明らかにした。一方、LOX-1に対する中和抗体は、酸化LDLによる細胞表面Fasの発現増強効果を有意に抑制し、同時にFas誘導アポトーシスに対する感受性を低下させた。これらの知見より、酸化LDLによるFas誘導アポトーシスの感受性獲得の機序は以下のように推察される。酸化LDLはLOX-1を介し細胞内へ取り込まれ、ユビキチン-プロテアソーム系の活性を低下させる。このため、細胞表面Fasの発現は増強され、Fas刺激に対する感受性を獲得する。
最近アンジオテンシンII (AngII)がLOX-1の発現を増強させると報告された。我々は、酸化LDLとAngllの相互作用によるFas誘導アポトーシスの感受性に及ぼす効果をみた。酸化LDLによるLOX-1 mRNAの発現増強効果は、Angllの追加投与により有意に高まった。またAngllの追加投与は、酸化LDLの単独投与に比し、Fas誘導アポトーシスを有意に増強させた。

研究成果

• [文献書誌] Imanishi T. et al.: "Apoptosis of vascular smooth muscle cells is induced by Fas ligand derived -----"Atherosclerosis. 161(1). 143-151 (2002)
• [文献書誌] Imanishi T, Hano T. et al.: "Oxidized low density lipoprotein potentiation of Fas-induced apoptosis -----"Circulation Journal. 66. 1060-1064 (2002)
• [文献書誌] Imanishi T, Hano T. et al.: "Inhibition of nuclear translocation of transcription factor nuclear factor-kappa B -----"Clin Exp Pharmacol Physiol. 30(3). 133-139 (2002)
• [文献書誌] Takarada S, Imanishi T. et al.: "Oxidized low-density lipoprotein sensitizes human vascular smooth muscle cells to-----"Clin Exp Pharmacol Physiol. (in press).
• [文献書誌] 今西 敏雄他: "血管内皮におけるFas-Fasリガンド伝達系の発現およびアポトーシスの誘導---"脈管学. 42. 325-331 (2002)
• [文献書誌] 財田 滋穂, 今西敏雄他: "血管平滑筋細胞に対する酸化LDLのアポトーシス誘導効果"脈管学. 42. 961-966 (2002)