| 研究概要 |
インターロイキン-1β(IL-1β)を腹腔内投与すると,視床下部室傍核(PVN)における一酸化窒素(NO)代謝物(NOx^-)濃度が増加することがわかっている(Ishizuka et al.1998).内側前頭前野(mPFC)に選択的GABA拮抗薬または作動薬を投与すると,PVNにおけるこのIL-1β誘発性のNOx^-濃度の増加反応にどのような効果をもたらすかを検討した.また,マイクロダイアリシス法と並行し,免疫組織化学法による形態学的研究を行い,IL-1β腹腔内投与後のラット脳を灌流固定し,免疫染色を施行した.摘出脳は,固定後,ミクロトームにより凍結切片とし,PVNにおけるnNOS/Fosの2重染色を行なった。切片上の免疫陽性細胞の観察・画像データ作成はCCDカメラ付光学顕微鏡により行い,画像データの定量的解析にはカメラに接続するコンピューターを用いた。実験には,生後2〜3ケ月のウイスター系雄性ラットを用いて,まずペントバルビタール麻酔下,マイクロダイアリシス用のガイドカニューレをPVNおよびmPFC上方2mmの位置に固定した.その5日後,マイクロダイアリシス用プローブをPVN領域およびmPFCに刺入した.無麻酔無拘束の条件下でマイクロインフュージョンポンプを用いて一定の流速(1μl/min)で人工リンゲル液をPVN領域に灌流し,サンプルは,連続的にオートインジェクター付き酸化窒素分析システムに注入し,NOx^-濃度を定量した.定常状態として3時間測定後、IL-1βを末梢投与し、PVN領域におけるNOx^-濃度の変化を測定した.IL-1β末梢投与後,選択的GABA拮抗薬をmPFCに局所灌流投与し,PVN領域におけるNOx^-濃度の変化を測定した.また,同様にして1L-1β末梢投与後,選択的GABA作動薬をmPFCに局所灌流投与し、PVN領域におけるNOx^-濃度の変化を測定した.IL-1βを腹腔内投与したラットにおいて,mPFCにGABA拮抗薬を灌流すると,PVNにおけるNOx^-濃度の増加反応は有意に増強した.また,1L-1βを腹腔内投与したラットにおいて,mPFCにGABA作動薬を灌流すると,PVNにおけるNOx^-濃度の増加反応は有意に減弱した.さらにIL-1βを腹腔内投与したラットにおいて,PVNにおけるnNOS/Fosの免疫染色では,nNOS陽性細胞の一部にFos蛋白発現が認められた.これらのことより,mPFCは,GABA神経系を介して直接または間接的にPVNを抑制的にコントロールしていることが示唆された.
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