2001 年度実績報告書

テロメラーゼ活性化分子、hTERTを標的とした造血器腫瘍の分子標的療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	13671086
研究機関	東京医科大学
研究代表者	田内哲三東京医科大学, 医学部, 講師 (80281377)
研究分担者	嶋本隆司東京医科大学, 医学部, 助手 (60317865)
キーワード	テロメラーゼ / hTERT / テロメア / アポトーシス
研究概要	(1)DN-hTERT、hTERTを含む高力価レトロウイルス産生細胞の作成:DN-hTERT、hTERTを含むレトロウイルスベクターpBABE-puro(Dr. Robert Weinbergより供与済み)をecotropic packaging cell line GP86にリン酸カルシュウム沈降法を用いてトランスフェクトし、48時後にそのsupernatantをamphotropic packaging cell line PA317に添加し105puroR CFU/ml以上の高力価ウイルスを作成した。 (2)DN-hTERT、hTERTの造血器腫瘍細胞株への導入実験上記により得られた高力価ウイルスを造血器腫瘍細胞株、K562及びRat-1 BCR/ABLへ導入し抗腫瘍効果、アポトーシス誘導効果を解析した。WT-hTERTを遺伝子導入したK562細胞株ではテロメラーゼ活性の上昇、テロメア長の延長が見られたがgrowth curveに変化は認められなかった。これに対し、DN-hTERTを遺伝子導入したK562細胞株ではテロメラーゼ活性の低下、テロメア長の短縮に引き続き、細胞増殖の停止、アポトーシス誘導が認められた。 (3)ヒト白血病モデルマウスにおけるDN-hTERTによる抗腫瘍効果及び抗癌剤感受性の亢進:WT-hTERT及びDN-hTERTをテロメラーゼ陽性ヒト急性リンパ性白血病細胞株、HAL-01に遺伝子導入を行った。DN-hTERTを遺伝子導入したHAL-01細胞株(late passage clone ; PD35)ではテロメラーゼ活性の低下、テロメア長の短縮に引き続き、細胞増殖の停止、アポトーシス誘導が確認された。また、DN-hTERTを遺伝子導入したHAL-01細胞株(early passage clone ; PD10)においてもDaunorubicin感受性の増加が確認された。さらに、Control vectorまたはWT-hTERTを遺伝子導入したHAL-01はヌードマウスに移植後、2ヵ月で腫瘍形成が確認されたが、DN-hTERTを遺伝子導入したHAL-01は4ヵ月の観察期間をおいても腫瘍形成を認めなかった。以上の結果より、DN-hTERT遺伝子導入によるtelomerase維持の破壊によりヒト白血病細胞のアポトーシス誘導が確認され、hTERTを分子標的とする白血病の遺伝子治療の有用性が示唆された。

研究成果

(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] Tauchi T., Yoshimura A., Ohyashiki K.: "CIS1, a cytokine-inducible SH2 protein, suppresses BCR/ABL-mediated transformation. Involvement of the ubiquitin proteasome pathway"Experimental Hematology. 29・3. 356-361 (2001)
[文献書誌] Nakajima A., Tauchi T., Ohyashiki K.: "ABL-specific tyrosine kinase inhibitor, STI571 in vitro, affects Ph-positive acute lymphoblastic leukemia and chronic myelogenous leukemia in blastic crisis"Leukemia. 15・6. 989-990 (2001)
[文献書誌] Ohyashiki K., Iwama H., Tauchi T., Shimamoto T., Hayashi S., Ando K., Kawakubo K., Ohyashiki J.H.: "Telomere dynamics and genetic instability in disease progression of chronic myelogenous leukemia"Leukemia and Lymphoma. 40・1&2. 49-56 (2001)
[文献書誌] Ohyashiki K., Iwama H., Yahata N., Tauchi T., Kawakubo K., Shimamoto T., Ohyashiki J.H.: "Telomere dynamics in myelodysplastic syndromes and acute leukemic transformation"Leukemia and Lymphoma. 40・3. 291-299 (2001)
[文献書誌] Ohyashiki J.H., Sashida G., Tauchi T., Ohyashiki K.: "Telomeres and Telomerase in hematologic neoplasia"Oncogene. 21・4. 680-687

2001 年度 実績報告書

テロメラーゼ活性化分子、hTERTを標的とした造血器腫瘍の分子標的療法の開発

研究代表者

田内 哲三 東京医科大学, 医学部, 講師 (80281377)

研究成果

[文献書誌] Tauchi T., Yoshimura A., Ohyashiki K.: "CIS1, a cytokine-inducible SH2 protein, suppresses BCR/ABL-mediated transformation. Involvement of the ubiquitin proteasome pathway"Experimental Hematology. 29・3. 356-361 (2001)

[文献書誌] Nakajima A., Tauchi T., Ohyashiki K.: "ABL-specific tyrosine kinase inhibitor, STI571 in vitro, affects Ph-positive acute lymphoblastic leukemia and chronic myelogenous leukemia in blastic crisis"Leukemia. 15・6. 989-990 (2001)

[文献書誌] Ohyashiki K., Iwama H., Tauchi T., Shimamoto T., Hayashi S., Ando K., Kawakubo K., Ohyashiki J.H.: "Telomere dynamics and genetic instability in disease progression of chronic myelogenous leukemia"Leukemia and Lymphoma. 40・1&2. 49-56 (2001)

[文献書誌] Ohyashiki K., Iwama H., Yahata N., Tauchi T., Kawakubo K., Shimamoto T., Ohyashiki J.H.: "Telomere dynamics in myelodysplastic syndromes and acute leukemic transformation"Leukemia and Lymphoma. 40・3. 291-299 (2001)

[文献書誌] Ohyashiki J.H., Sashida G., Tauchi T., Ohyashiki K.: "Telomeres and Telomerase in hematologic neoplasia"Oncogene. 21・4. 680-687

2001 年度実績報告書

田内哲三東京医科大学, 医学部, 講師 (80281377)