2002 年度実績報告書

ヒトIgA腎症惹起抗原を用いた新しいIgA腎症モデルの構築

研究課題

研究課題/領域番号	13671096
研究機関	筑波大学
研究代表者	小山哲夫筑波大学, 臨床医学系, 教授 (80111384)
研究分担者	平山浩一筑波大学, 臨床医学系, 講師 (10302423) 山縣邦弘筑波大学, 臨床医学系, 助教授 (90312850)
キーワード	IgA腎症 / モデル動物 / Th1 ＆ Th2 cells / Staphylococcus aureus / monoclonal Abs
研究概要	(1)BALB/C mouse(Th 2 type)とB/6 mouse(Th 1 type)を抗原とS. aureusの膜成分をFreund incomplete adjuvantと共に2週毎に皮下に免疫した.免疫後4、8、12、16,24週目に屠殺した. (a)BALB/C mouseでは周齢が高くなるにつれ、糸球体メサンギウムにIgG, IgA, C3抗体、ならびにS. aureus抗原の沈着が増加した.(b)産生された抗体をヒトHGGでProteinで吸収した膜抗原をcoateしたELISA法で測定したところ、対照群に比して有意に抗S. aureus抗体(IgGおよびIgA)の上昇をみた.(c)光顕では軽度〜中等度のメサンギウム増殖性腎炎が発症した.(d)一方対照群のB/6群では軽度の免疫グロブリンの沈着を認めるも、S. aureus抗原の局在は認めなかった. (e)BALB/c mouse群では対照群に比して、有意に多量の蛋白尿を認めた. (f)BALB/mouse免疫後の脾細胞にS. aureus抗原を加え、培養したところ、有意に抗S. aureus IgA抗体の上昇を認めた. (2)抗S. aureusに対するmouse monoclonal antibodyの作成:PG法によりBALB/Cの脾細胞とNS1とhybridomaを作成し、モノクローナル抗体を得た.この抗体を用いて、ヒトIgA腎症患者の組織中のS. aureus抗原を確認すると同時に、S. aureus菌体成分に対するwestern blotを行い、34kDaのバンドと反応することを確認した. (3)抗S. aureus抗体を用いて、免疫沈降法で得られた抗原のアミノ酸配列を検討し、S. aureus膜成分の一部であることを確認した. 以上の結果から、S. aureus膜抗原を用いたmouse IgA腎症類似病変の惹起には、Th 2 typeの免疫遺伝学的背景を有することが重要である.今後IgAへのクラススイッチ機序、大腸菌に発現させた抗原を用いた抗原を用いた動物実験等を検討する予定である.

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Koyama A, et al.: "Glomerulonephritis associated with MRSA infection : A possible role of bacterial superantigen"Kidney Int. 47. 207-216 (1995)
[文献書誌] Yoh K et al.: "Cytokines and T-cell responses in superantigen-related glomerulonephritis following methicillin-resistant staphylococcus aureus infection"Nephrol Dial Transplant. 5. 1170-1174 (2000)
[文献書誌] Ebihara I et al.: "Th2 predominance at the single-cell level in patients with IgA nephropathy"Nephrol Dial Transplant. 16. 1783-1789 (2001)
[文献書誌] Hirayama K et al.: "Predominance of type-2 immune response in idiopathic membranous nephropathy"Nephron. 91. 255-261 (2002)
[文献書誌] Yamagata K et al.: "Mitochondrial DNA mutations in focal segmental glomerulosclerosis lesions"J Am Soc Nephrol. 13. 1816-1823 (2002)
[文献書誌] Muro K et al.: "Usage of T cell receptor variable segments of the beta-chain in IgA nephropathy"Nephron. 92. 56-63 (2002)

2002 年度 実績報告書

ヒトIgA腎症惹起抗原を用いた新しいIgA腎症モデルの構築

研究代表者

小山 哲夫 筑波大学, 臨床医学系, 教授 (80111384)

研究成果

[文献書誌] Koyama A, et al.: "Glomerulonephritis associated with MRSA infection : A possible role of bacterial superantigen"Kidney Int. 47. 207-216 (1995)

[文献書誌] Yoh K et al.: "Cytokines and T-cell responses in superantigen-related glomerulonephritis following methicillin-resistant staphylococcus aureus infection"Nephrol Dial Transplant. 5. 1170-1174 (2000)

[文献書誌] Ebihara I et al.: "Th2 predominance at the single-cell level in patients with IgA nephropathy"Nephrol Dial Transplant. 16. 1783-1789 (2001)

[文献書誌] Hirayama K et al.: "Predominance of type-2 immune response in idiopathic membranous nephropathy"Nephron. 91. 255-261 (2002)

[文献書誌] Yamagata K et al.: "Mitochondrial DNA mutations in focal segmental glomerulosclerosis lesions"J Am Soc Nephrol. 13. 1816-1823 (2002)

[文献書誌] Muro K et al.: "Usage of T cell receptor variable segments of the beta-chain in IgA nephropathy"Nephron. 92. 56-63 (2002)

2002 年度実績報告書

小山哲夫筑波大学, 臨床医学系, 教授 (80111384)