乳癌のエストロゲン枯渇耐性獲得におけるエストロゲン受容体の機能制御機構

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671169
• 研究機関: (財)放射線影響研究所
• 研究代表者: 江口 英孝 財団法人放射線影響研究所, 放射線生物学・分子疫学部, 研究員 (00260232)
• 研究分担者: 正村 滋 東京歯科大学, 病院・助教授 (40190342)
• キーワード: 乳癌 / エストロゲンレセプター

研究概要

エストロゲン依存性の増殖を示すMCF-7B細胞を長期間エストロゲン枯渇下で培養することにより得られた耐性株MCF-7Dと親株であるMCF-7Bにおけるエストロゲンレセプターα(ERα)の転写活性について検討を行った。エストロゲン応答配列(ERE)をプロモーター上流に有するルシフェラーゼレポーター遺伝子を導入し、各種エストロゲン濃度下でのエストロゲン枯渇下でもMCF-7D細胞は内因性ERαの転写活性が認められ、さらにERαの活性化ドメインであるAF-1ならびにAF-2は、それぞれがエストロゲン枯渇下のMCF-7D細胞における活性化に寄与していることをGal4DBDのDNA結合ドメインを連結したキメラ遺伝子を一過的に導入することにより明らかにした。また、EREをモチーフとするDNA-pull down実験により、転写活性化に関与する蛋白質コンプレックスに違いが認められた。一方、細胞生物学的な実験によりMCF-7D細胞におけるMAPKの恒常的活性化が直接的にERαの活性化を担っている事を明らかにした。この活性化メカニズムについてさらに詳細に検討するために、本年度はMCF-7DにAF-1あるいはAF-2とGal4DBDのDNA結合ドメインを連結したキメラ遺伝子を安定に発現する形質転換株の作成を行った。また、この細胞をエストロゲン存在下で長期培養を行うことにより、エストロゲン依存性を示す細胞へ変換したものも調整した。これらの形質転換株を用いてさらに詳細な転写活性化機構について明らかにする。

研究成果

• [文献書誌] Hayashi S: "Expression and function of ERα and ERβ in human breast cancer and its clinical application"Endocr Relat Cancer. (in press).
• [文献書誌] Sakamoto T: "Estrogen receptor-mediated effects of tamoxifen on human endometrial cancer cells"Mol Cell Endocrinol. 192(1-2). 93-104 (2002)
• [文献書誌] Matsuyama S: "Estrogen receptor beta is expressed in human stomach adenocarcinoma"J Cancer Res Clin Oncol. 128(6). 319-324 (2002)
• [文献書誌] Yue W: "Activation of the MAPK pathway enhances sensitivity of MCF-7 breast cancer cells to the mitogenic effect of estradiol"Endocrinology. 143(9). 3221-3229 (2002)
• [文献書誌] Omoto Y: "Expression, function and clinical implications of the estrogen receptor beta in human lung cancers"Biochem Biophys Res Commun. 285(2). 340-347 (2001)
• [文献書誌] Santen R: "Adaptive hypersensitivity to estradiol : potential mechanism for secondary hormonal responce in breast cancer patients"J Steroid Biochem Mol Biol. 79(1-5). 115-125 (2001)