単球走化因子MCP-1をターゲットとした血管内膜肥厚に対する新しい遺伝子治療開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671241
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 古森 公浩 九州大学, 医学部・附属病院, 助教授 (40225587)
• 研究分担者: 古山 正 九州大学, 医学部・附属病院, 医員(臨床) ; 庄司 哲也 九州大学, 医学部・附属病院, 医員(臨床) ; 米満 吉和 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (40315065)
• キーワード: 血管内膜肥厚 / MCP-1 / 遺伝子治療

研究概要

【背景】バルーン障害後血管の晩期狭窄は内膜肥厚およびncgative remodelingがその原因とされており、その成因として障害後初期の血管壁での炎症性変化が考えられている。【目的】単球走化因子であるMCP-1をblockし、バルーン障害後血管に対する効果を検討する。【方法】MCP-1と競合作用をホす変異型MCP-1(7ND))遺伝子あるいはPBS(control)をelectroporation法を用いウサギ大腿筋に導入し3日後に頚動脈をバルーン傷害した。障害後3、7、28日後にharvestを行い、以下の項目を検討した。【結果】1.大腿筋へのluciferase遺伝子導入によりその発現をみるとIuciferase活性は2日目には7.5×107RLU/mgに達し、14日目にはその1/7まで活性が低下するが、28日後もなお同レベルで、発現が長く持続することが確認された。2.摘出した頚動脈をRAM11にて免染した。全細胞に占めるRAM11陽性細胞数の割合は内膜、中膜それぞれ7ND導入群で3日後2.6%、11.6%、7日後6.3%、19.2%、28日後24.9%、21.9%とcontrol群の3日後41.6%、48.1%、7日後21.3%、52.2%、28日後45%、65.4%に比し有意に低く、MΦの浸潤が7NDにより有意に抑制され。3.障害28日後の内膜面積およびI/M比は7ND群0.39±0.05mm2,0.69±0.07といずれもcontrol群0.66±0.12mm2,1.06±0.13に比し有意に小さく内膜肥厚が抑制された。4.障害28日後の内腔面積、IEL(内弾性板長)、EEL(外弾性板長)はそれぞれ7ND群で1.9±0.2mm,11.5±0.3mm,12.4±0.4mmといずれもcontrol群の1.4±0-1mm,10.2±0.2mm,11.2±0.2mmに比し、有意に大きくnagative remodelingが抑制されていた。【考察】今回の実験ではMCP-1の作用をblockすることでバルーン障害後の内膜肥厚およびnegative remodeling抑制できた。又この遺伝子の導入がelectroporation法により容易にかつ効率よく可能で、その持続期間も長いことから新しい遺伝子治療として期待できると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Komori K, Shoji T, Furuyama T, Yonemitsu Y, Mori E, Yamaoka T, Matsumoto T, Sugimachi K: "Nonpenetrating vascular clips anastomosis inhibited intimal thcikening under poor runoff conditions in canine autogenous vein grafts"Eur J Vasc End Surg. 21. 241-247 (2001)
• [文献書誌] Komori K, Furuyama T, Shoji T, Kume M, Mori E, yamaoka T, Sugimachi K.: "Inhibitory effect of prostaglandin E1 in intimal thickening caused by poor runoff conditions in the canine autogenous vein grafts"J Cardiovasc Pharmacol. 38. 686-692 (2001)
• [文献書誌] Ishida M, Komori K, Yonemitsu Y, Matsumoto T, Onohara T, Sugimachi K.: "Immunohistochemical phenotipic alterations of rabbit autologous vein grafts implanted under arterial circulation with or without poor distal run off-implications of vein graft remodeling-"Atherosclerosis. 154. 345-354 (2001)
• [文献書誌] Wei CG, Komori K, Mori E, Kume M, Yamaoka T, Matsumoto T, Sugiamchi K.: "Natural course of the functional and morphological changes in canine autogenous arterial graft"Eur Surg Res. 33. 21-27 (2001)
• [文献書誌] Matsumoto T, Komori K, Shoji T, Kuma S, Kume M, Yamaoka T, Mori E, Furuyama T, Yonemitsu Y, Sugimachi K:: "Successful and optimized in vivo gene transfer to rabbit carotid artery mediated by electronic pulse"Gene Therapy. 8. 1174-1179 (2001)
• [文献書誌] Masaki I, Yonemitsu Y, Komori K, Ueno H, Nakashima Y, Nakagawa K, Fukumura M, Kato A, Hasan MK, Nagai Y, Sugimachi K, Hasegawa M, Suishi K:: "Reconbinant Sendal virus-mediated gene transfer to vasculature: a new class of efficient gene transfer vector to the vascular system"FASEB Journal. 15. 1294-1296 (2001)