前立腺における核内レセプターの研究―新規レセプターがアンチアンドロゲン抵抗性に及ぼす影響について―

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671667
• 研究機関: 大阪市立大学
• 研究代表者: 川嶋 秀紀 大阪市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (70234060)
• キーワード: SRAP / anti-androgen / hormone-refractory prostate cancer / steroid receptor coactivator

研究概要

ラット前立腺ライブラリーよりアンドロゲンレセプター(AR)関連遺伝子を探索中にヒトSRAと78.2%の塩基配列の相同性をもったcDNAを得た。SRAは蛋白に翻訳されずRNAとしてステロイドレセプターによる転写を促進する共役因子として報告されたが、我々がクローニングしたcDNAはORFやKozakの配列を含む開始コドンを有しており、その蛋白(SRAPと命名した)としての機能につき検討した。まず、SRAPの共発現によりAR, GR, PPARγの活性がリガンド依存性に上昇した。GST pull-down assayによりARのAF2+DBDとSRAPの結合をin vitroで示すと共に、mammalian two-hybrid assayを用いてARのAF2+DBDとSRAPの結合をin vivoで示した。GFPとSRAPの融合蛋白はHeLa細胞でin vivo translationされこのfusion proteinのcDNAに変異を導入すると共役因子としての活性が消失した。これらの事によりSRAPはSRAとはことなり蛋白として機能する新しい核内レセプター共役因子であることが示された。更にSRAPをHeLa cellや前立腺癌細胞に導入するとアンチアンドロゲンであるflutamide存在下でもAR活性は維持された。これらのことより、SRAPはステロイドレセプター共役因子蛋白であり、ARの活性化にかかわっている。

研究成果

• [文献書誌] Kawashima, H., Takano, H., Sugita, S., Takahara, Y., Sugimura, K., Nakatani, T.: "A novel steroid receptor coactivator SRAP as an alternative form of steroid receptor RNA activator gene : expression in prostate cancer cells and enhancement of androgen receptor activity"Biochemical Journal. 369. 163-171 (2003)