排卵機構における卵巣局所調節因子に関する研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671722
• 研究機関: 徳島大学
• 研究代表者: 苛原 稔 徳島大学, 医学部, 教授 (20160070)
• キーワード: GRO-CINC / ケモカイン / インターロイキン / 排卵 / 卵胞閉鎖

研究概要

本研究では、卵胞発育、排卵、卵胞閉鎖機構に卵巣局所に存在する各種サイトカイン、成長因子の関与を明らかにする一環として、幼弱メスラットを用い、卵巣におけるインターロイキンやケモカイン、細胞増殖因子の存在、ならびにそれが排卵機構に関与するホルモンあるいは成長因子、サイトカインなどにより調節を受けるか否かを検討している。
これまでに、莢膜細胞層にGRO-CINCが存在すること、ラット排卵過程において、PMSGだけではGRO-CINCの産生は亢進しないが、PMSGの投与後にhCGを投与するとその4時間後から48時間後にかけてGRO-CINCの産生が亢進すること、FSH、hCG、IL-1βおよびTNFαはCINC/groの産生を濃度依存性に促進させることを明らかにした。
平成15年度は、PMSG/hCG刺激による排卵過程における卵巣内のGRO-CINCおよびその調節因子と考えられるIL-1β,TNFα産生の推移を検討し、また、GRO-CINCの中和抗体をラット腹腔内へ投与し、PMSG/hCG刺激を行い、卵管内に排卵された卵を実体顕微鏡下に観察し、排卵過程におけるGRO-CINCの生理的役割を検討した。
1.PMSG-hCG処理ラットでは、卵巣内のCINC/gro、IL-1β、TNFαの産生量はhCG投与後に急激に増加し、IL-1β、TNFαではhCG投与の4時間後、CINC/groは6時間後といずれも排卵以前にピークに達した(P<0.01、0.05、0.01、ピーク値vs投与前値)。CINC/groのピーク値は投与前値の3.7倍であった。CINC/gro mRNAもhCG投与後に強く発現した。このようにPMSG/hCG刺激による排卵過程ではGRO-CINCのピークに先だって、IL-1b, TNFaの産生のピークが見られた。
2.排卵数は、正常家兎血清を投与した対照の64.0±18.2個(平均±標準偏差)に対し、抗CINC/gro抗体を投与した群では42.8±14.3個と有意に少数で(P<0.05)、抗CINC/gro抗体の腹腔内投与により、排卵数は33%減少した。
以上より、ケモカインのCINC/groは、LHサージ後のIL-1βおよびTNFαの上昇を介して卵巣の莢膜細胞に発現し、好中球を卵胞周囲に遊走させることにより、ラットの排卵現象に関与している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Toshiyuki Yasui: "Stimulatory effect of the herbal medicine Keishi-bukuryo-gan on a cytokine-induced neutrophil chemoattractant, in rat ovarian cell culture"Am J Reprod Immunol. 50・1. 90-97 (2003)
• [文献書誌] Toshiyuki Yasui: "The herbal medicine Unkei-to stimulates the secretion of a cytokine-induced neutrophil chemoattractant, CINC/gro, in the rat ovarian cell culture"Am J Reprod Immunol. 49・1. 14-20 (2003)
• [文献書誌] Michiko Tezuka: "Effects of leptin on gonadotropin secretion in juvenile female rat pituitary cells"European Journal of Endocrinology. 146・2. 261-266 (2002)
• [文献書誌] Hirokazu Uemura: "Serum osteoprotegerin/osteoclastogenesis-inhibitory factor during pregnancy and lactation and the relationship with calcium-regulating hormones and bone turnover markers"Journal of Endocrinology. 33・5. 353-359 (2002)
• [文献書誌] Mitsuhiro Kimura: "The obesity in bilateral ovariectomized rats is related to a decrease in the expression of leptin receptors in the brain"Biochemical and Biophysical Research Communications. 290・4. 1349-1353 (2002)
• [文献書誌] Minoru Irahara: "Orexin-A suppresses the pulsatile secretion of luteinizing hormone via beta-endorphin"Biochemical and Biophysical Research Communications. 281・1. 232-236 (2001)