子宮内膜・脱落膜および胎盤組織における血管内皮増殖因子(VEGF)の発現と調節

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671733
• 研究機関: 大分大学(医学部)
• 研究代表者: 宮川 勇生 大分大学, 医学部, 教授 (70040607)
• 研究分担者: 嶺 真一郎 大分大学, 医学部, 助手 (00336273) ; 河野 康志 大分大学, 医学部, 助手 (40274758)
• キーワード: 血管内皮増殖因子 / 子宮内膜間質細胞 / 羊膜細胞

研究概要

今年度は採取した子宮内膜より子宮内膜間質細胞を分離・培養を行い、さらに子宮内膜上皮細胞の性質をもつ子宮内膜癌継代培養細胞株であるHHUAも培養し、granulocyte chemotactic protein (GCP)-2、interleukin (IL)-6、IL-11、IL-8、monocyte chemoattractant protein (MCP)-1、growth-regulated oncogene (GRO)βなどのサイトカインやケモカインの産生調節について検討した。
GCP-2やGROβは子宮内膜間質細胞やHHUAにおいてlipopolysaccharide (LPS)、IL-1βおよびtumor necrosis factor (TNF)-α添加により産生が促進した。
IL-13とTNF-βは子宮内膜間質細胞におけるIL-6、IL-11、IL-8ならびにMCP-1の産生を促進した。
子宮内膜間質細胞とHHUAに対してleptinを添加しサイトカインの産生調節を検討したところ、IL-6、IL-8、GROβおよびMCP-1の産生を促進した。
一方、羊膜継代培養細胞(WISH cells)を培養し、VEGFの産生におけるMitogen-activated protein (MAP) kinaseを介した細胞内情報伝達系の検討を行った。
EGF受容体やIGF受容体などの受容体型tyrosine kinaseは蛋白が結合すると、二量体を形成することで活性化する。EGF受容体やIGF受容体からの細胞内情報伝達系にはMAP kinaseが重要であることが示唆されているため、EGFおよびIGF-1を添加して刺激後のMAP kinaseのリン酸化をWestern immunoblot analysisにより解析した。
WISH cellsにおいてはEGFおよびIGF-1の添加でMAP kinaseがリン酸化され、MEK阻害剤の添加でリン酸化は抑制された。

研究成果

• [文献書誌] Mine S, Nasu K, Fukuda J, Sun B, Miyakawa I.: "Secretion of granulocyte chemotactic protein-2 by cultured human endometrial stromal cells"Fertility and Sterility. 79・1. 146-150 (2003)
• [文献書誌] Nasu K, Fukuda J, Sun B, Nishida M, Miyakawa I.: "Interleukin-13 and tumor necrosis factor-beta differentially regulate the production of cytokines by cultured human endometrial stromal cells"Fertility and Sterility. 79・Suppl 1. 821-827 (2003)
• [文献書誌] Kawasaki F, Kawano Y, Kosay Hasan Z, Narahara H, Miyakawa I.: "The clinical role of interleukin-6 and interleukin-6 soluble receptor in human follicular fluids"Clinical and Experimental Medicine. 3・1. 27-31 (2003)
• [文献書誌] Kawano Y, Zeineh Hasan K, Fukuda J, Mine S, Miyakawa I.: "Production of vascular endothelial growth factor and angiogenic factor in human follicular fluid"Molecular and Cellular Endocrinology. 202・1-2. 19-23 (2003)
• [文献書誌] Fukuda J, Nasu K, Sun B, Mine S, Kawano Y, Miyakawa I.: "Expression of growth-regulated oncogene beta in an endometrial epithelial cell line. HHUA. and cultured human endometrial cells"Journal of Reproductive Immunology. 59・1. 61-70 (2003)
• [文献書誌] Fukuda J, Nasu K, Sun B, Shang S, Kawano Y, Miyakawa I.: "Effects of leptin on the production of cytokines by cultured human endometrial stromal and epithelial cells"Fertility and Sterility. 80・suppl 2. 783-787 (2003)