| 研究概要 |
腹膜播種,血管新生抑制を標的とした卵巣癌に対する遺伝子治療の確立を目指し,分子標的物質であるNK4,bikunin,IL-10,PTENについて基礎的研究を行い,以下の結果が得られた。
1)NK4遺伝子導入卵巣癌細胞HRA/NK4は多量のNK4を分泌するとともに遊走能の有意な低下がみられた。in vivoヌードマウスの検討では,有意な腹膜播種の減少と生存期間の延長が観察された。
2)bikuninの活性部位であるHI8に,癌細胞に高親和性を有するATFを付加したキメラ遺伝子・ATF-HI8の作成に成功した。これをHRA株に遺伝子導入し,ATF-HI8高発現株(HRA-ATF-HI8)を樹立した。HRA-ATF-HI8は遊走能,浸潤能の有意な低下がみられた。
3)IL-10遺伝子導入卵巣癌細胞SHIN-3/IL-10は,培養液中に多量のIL-10を分泌し,かつHUVECの増殖を阻害した。in vitroの細胞倍加時間には差はみられなかったが,in vivoにおける新生血管数は有意な減少がみられ,腫瘍倍加時間が有意に延長した。さらにヌードマウスにおける腹膜播種・腹水産生の有意な減少と,生存期間の延長が確認された。さらにアデノフリーシステムにより,IL-10発現AAVペクター(AAV-IL-10)の作成に成功した。このAAV-IL-10をヌードマウス骨格筋に筋注すると,血清IL-10濃度はコントロールの40倍以上を12週にわたり維持することができた。
4)PTEN遺伝子導入卵巣癌細胞HRA/PTENは,遊走能の有意な低下がみられた。またPTEN導入卵巣癌細胞SHIN-3/PTENは,活性型CPT-11であるSN-38に対して親株の6.6倍の高感受性を示すことが判明した。またSN-38接触によりアポトーシス細胞の有意な増加が認められた。
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