腹膜播種制御を目的とした卵巣癌遺伝子治療に関する基礎的研究

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671740
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 鈴木 光明 自治医科大学, 医学部, 教授 (50110870)
• 研究分担者: 小林 浩 浜松医科大学, 医学部, 助教授 (40178330) ; 小澤 敬也 自治医科大学, 医学部, 教授 (30137707) ; 大和田 倫孝 自治医科大学, 医学部, 助教授 (40203955)
• キーワード: 卵巣癌 / 腹膜播種 / 血管新生抑制 / 分子生物学 / 遺伝子治療 / bikunin / IL-10 / soluble Flt-1

研究概要

腹膜播種,血管新生抑制を標的とした卵巣癌に対する遺伝子治療の確立を目指し,分子標的物質であるbikunin, IL-10,soluble Flt-1(s-Flt-1),thymidine phosphorylase (TP)について基礎的研究を行い,以下の結果を得た。
1)bikuninの活性部位HI8にATFを付加したキメラ遺伝子ATF-HI8は強力な細胞遊走抑制および浸潤抑制作用を有し,遊走抑制作用の一部にはATFが関与することが明らかとなった。また卵巣癌細胞にbikuninを遺伝子導入して作製した高発現細胞は,腹膜播種の抑制が認められた。
2)IL-10発現AAVベクター(AAV-IL-10)をマウス骨格筋に筋注すると,血清IL-10濃度の上昇がみられ,卵巣癌細胞SHIN-3の腹膜播種が有意に抑制された。さらに生存期間の延長がみられた。一方,KOC-2S細胞(VEGF低発現株)に対しては効果がみられなかったことから,IL-10(AAV-IL-10)のこの作用はVEGFを介することが示唆された。
3)sFlt-1遺伝子導入卵巣癌細胞SHIN-3/sFlt-1は遊走能および腹膜種播能が有意に低下した。またアデノフリーシステムによりsFlt-1発現AAVベクター(AAV-sFlt-1)の作成に成功した。このAAV-Flt-1をヌードマウス骨格筋に筋注すると,SHIN-3腫瘍の増殖が顕著に抑制され,また腹膜播種の抑制も確認された。またAAV-sFlt-1筋注により,腫瘍の新生血管数(CD31免染)が有意に抑制された。

研究成果

• [文献書誌] Suzuki, M.: "Suppression of invasion and peritoneal carcinomatosis of ovarian cancer cell line by overexpression of bikunin."Int J Cancer. 104. 289-302 (2003)
• [文献書誌] Tsukagoshi, S.: "Thymidine phosphorylase-mediated angiogenesis regulated by thymidine phosphorylase inhibitor in human ovarian cancer cells in vivo."Int J Oncol. 22. 961-967 (2003)
• [文献書誌] Suzuki, M.: "Bikunin target genes in ovarian cancer cells identified by microarray analysis."J Biol Chem. 278. 14640-14646 (2003)
• [文献書誌] Saga, Y.: "Overexpression of thymidylate synthase mediates desensitization for 5-fluorouracil of tumor cells."Int J Cancer. 106. 324-326 (2003)
• [文献書誌] Kohno, T.: "Interleukin-10-mediated inhibition of angiogenesis and tumor growth in mice bearing VEGF-producing ovarian cancer."Cancer Res. 63. 5091-5094 (2003)
• [文献書誌] Saga, Y.: "Suppression of cell migration in ovarian cancer cells mediated by PTEN overexpression."Int J Oncol. 23. 1109-1113 (2003)