内リンパ水腫形成におけるバゾプレッシンの役割に関する研究

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671784
• 研究機関: 高知医科大学
• 研究代表者: 竹田 泰三 高知医科大学, 医学部, 教授 (50115763)
• 研究分担者: 柿木 章伸 高知医科大学, 医学部附属病院, 講師 (60243820) ; 岡田 暉彦 高知医科大学, 医学部, 助教授 (00025628)
• キーワード: 内リンパ水腫 / バソプレッシン / V_2アンタゴニスト / アクワポリン2 / メニエール病 / OPC-31260

研究概要

前庭眼反射計測実験:モルモットの振子様回転中の前庭眼反射を記録するシステムを開発した。そのシステムの要約は、1)眼球の動きを赤外線カメラによってビデオ記録する。2)録画された眼球の瞳孔を楕円近似法によりコンピュータ解析し、眼球の回転角度および回転速度を検出する。3)得られた眼球回転速度より緩徐相と急速相を判別する。4)眼振緩徐相速度とターンテーブルの回転角速度よりVORゲインを計測、グラフ化する。開発したこのシステムを使ってモルモットの振子様回転中の前庭眼反射の記録を試みた。その結果、以下の点を留意すればモルモットの前庭眼反射は容易に分析可能であることが判明した。すなわち、瞳孔を赤外線カメラによって正確に識別するには、有色モルモットを用いる必要があること、瞬きのアーチファクトを避けるためには顔面神経ブロックを行って瞬目反射を抑止する必要があることの2点であった。
バゾプレッシン(VP)負荷実験:Whister ratにVPを皮下に埋めたosmutic mini pumpで慢性投与した。形態学的には蝸牛に内リンパ水腫が発症した。分子生物学的には、蝸牛と内リンパ嚢のAquaporin2(AQP2)mRNAの発現量をReal-time RT-PCR法によって検討した。AQP2のmRNAは蝸牛、内リンパ嚢とも発現し、バソプレッシン負荷によってその発現量は増加した。
V_2-アンタゴニスト負荷実験:実験的内リンパ水腫の鼓室階にV_2-アンタゴニスト(OPC-31260)または生理食塩水を浸透圧ミニポンプで投与して内リンパ腔の容積変化を比較検討した。形態的には、生理食塩水の鼓室階投与では著明な内リンパ水腫が観察されるが、OPC-31260の負荷動物ではライスネル膜は著明に進展しているが、内リンパ腔は虚脱を示した。OPC-31260の経静脈投与は蝸牛、内リンパ嚢ともAQP2 mRNAの発現を抑制した。

研究成果

• [文献書誌] Kitano H, Takeda T, Takeda S, Suzuki M, Kitanishi T, Kitajima K, Kimura H, Tooyama I: "Endolymphatic hydrops by administration of vasopressin in the rats"Acta Histochem Cytochem. 34. 229-233 (2001)
• [文献書誌] Sawada S, Takeda T, Kitano H, Takeuchi S, Kakigi A, Azuma H: "Aquaporin-2 regulation by vasopressin in the rat inner ear"NeuroReport. 13. 1127-1129 (2002)
• [文献書誌] Takeda T, Sawada S, Takeda S, Kitano H, Suzuki M, Kakigi A, Takeuchi S: "The effects of V_2-antagonist (OPC-31260) on endolymphatic hydrops"Hearing Res. (in press).