| 研究課題/領域番号 |
13671823
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
眼科学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
天野 史郎 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (80193027)
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| 研究分担者 |
加賀屋 文絵 東京大学, 医学部附属病院, 助手 (40311617)
大鹿 哲郎 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (90194133)
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| 研究期間 (年度) |
2001 – 2002
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| キーワード | 角膜 / 角膜移植 / 人工角膜 / 角膜内皮細胞 / ティッシュ・エンジニアリング |
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| 研究概要 |
継代培養された培養ヒト角膜内皮細胞(human corneal endothelial cell、HCEC)ではドナー年齢が高いほど大型老化細胞が多く出現した。プリオン感染の危険性のあるウシ材料からの脱却を目指して、ウシ血清の代わりに成人血清を用いてHCECの培養を行った所、HCECの効率的な初代および継代培養が可能であった。培養HCECとヒト角膜実質から角膜を再構築した。HCECの浮遊液を実質上に播種後、細胞接着を促進するために角膜片を遠心したところ、内皮細胞密度を2500 cells/mm^2まで高めることができた。この再構築角膜の内皮細胞のポンプ機能をウッシング・チャンバーで検討したところ、再構築角膜は正常角膜内皮の75%のポンプ機能を有することが確認された。再構築角膜を白色家兎へ移植したところ、角膜の透明性が6か月間維持された。アルカリ可溶化コラーゲンを用いて作製した人工実質は、透明性・生体適合性・細胞接着性が良好であった。ブタ角膜では異種糖鎖抗原α-galエピトープの発現が少なく、カニクイサルの角膜層間にブタ角膜実質を移植したところ、超急性拒絶反応は起こさず細胞性拒絶反応を起こした。ブタ角膜実質と培養HCECを用いて作製した再構築角膜は平均で1721cells/mm^2の細胞密度を持ち、ウッシングチャンバーを用いた解析では、正常ブタ角膜内皮の60%程度のポンプ機能を示した。以上より、培養HCECを用いた再構築角膜の臨床応用の可能性が示された。
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